商品属性:
| 产品名称 |
细黄链霉菌 |
规格 |
冻干粉 |
| 英文名称 |
Streptomyces microflavus |
货号 |
YS-JZ1650 |
| 生长条件 |
28℃;5-7d;好氧 |
用途 |
仅供科研 |
培养基 高氏一号琼脂:可溶性淀粉:20.0,硝酸钾:1.0,磷酸氢二钾:0.5,硫酸镁:0.5,氯化钠:0.5,硫酸亚铁:0.01,琼脂:15.0,pH:7.2±0.2(25℃)
生长条件 28℃;5-7d;好氧;
形态 菌落橙黄色,孢子丝直,G+(蓝紫色),放线菌,纯度:纯
分离基物 土壤
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述平板 1-2 块;②生物安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;③吸取 0.5mL 无菌水打入冻干管,充分溶解菌粉后,打入平板中 200μL / 个,涂布均匀;④将平板置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。
参考用途 农用抗生素、植物病害生防
常规保藏:
1、短期保存:斜面菌株于 2–8℃密封存放,传代不超过 5 代,防止多次转接造成性状变异。
2、长期保存:采用 20% 甘油菌液在 - 80℃超低温冻存,可稳定保存 2–5 年,菌株活性基本保持不变。
3、活化方法:冻干菌种需全部溶解后接种,使用含 5% 脱纤维羊血的血琼脂平板,37℃厌氧培养 24–48 小时;复苏较慢菌株可适当延长培养时间。
操作步骤:
1. 菌株复苏活化操作
取出-80℃超低温冻存的GBS标准菌株(ATCC 13813等),于室温环境下快速解冻。采用无菌接种环挑取少许菌液,通过四区划线法接种至5%脱纤维羊血琼脂平板。将接种后的平板置于37℃恒温培养箱中静置培养24~48h,培养过程无需通入CO₂,待培养结束后观察菌落形态,合格菌落为灰白色、圆形光滑且呈现β-溶血特征。实验过程中严格管控菌株传代次数,确保不超过5代,有效防止菌株遗传变异、毒力衰减及酶活性缺失问题。
2. 临床样本选择性增菌处理
获取阴道拭子、直肠拭子、血液、脑脊液等临床GBS检测样本后,即刻接种至LIM肉汤或TransVag选择性增菌肉汤体系中。将样本培养液置于37℃恒温条件下孵育18~24h,借助肉汤中含有的庆大霉素、萘啶酸成分抑制杂菌生长,实现低浓度GBS菌株的富集浓缩。需严格遵循实验规范,即便后续开展核酸检测,也必须完成前置增菌步骤,该操作可大幅提升检测灵敏度,降幅可达90%以上,有效规避非溶血GBS菌株漏检情况。
3. 菌株分离纯化与初步鉴定
吸取完成增菌培养的肉汤样本,划线接种于GBS显色培养基平板,设置培养温度35±2℃,恒温孵育18~24h。培养结束后挑选平板上典型的蓝绿色、紫罗兰色可疑菌落,进行革兰氏染色显微镜检,GBS菌株镜下特征为革兰氏阳性、链状排列球菌。随后开展触酶试验,向菌落处滴加3%过氧化氢溶液,若无气泡产生,即可排除葡萄球菌属等触酶阳性杂菌,完成GBS初步筛选鉴定。
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