商品属性:
| 产品名称 |
戊糖片球菌 |
规格 |
冻干粉 |
| 英文名称 |
Pediococcus pentosaceus |
货号 |
YS-JZ1646 |
| 生长条件 |
37℃;48h;微厌氧 |
用途 |
仅供科研 |
培养基 MRS 琼脂:蛋白胨:10.0,牛肉浸粉:8.0,酵母浸粉:4.0,葡萄糖:20.0,吐温 80:1.0,乙酸钠:5.0,柠檬酸二铵:2.0,磷酸氢二钾:2.0,硫酸镁:0.2,硫酸锰:0.05,琼脂:15.0,pH:6.2±0.2(25℃)
生长条件 37℃;48h;微厌氧;
形态 菌落细小乳白色,圆形,G+(蓝紫色),球菌成对或短链,纯度:纯
分离基物 发酵食品
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述 MRS 平板 1-2 块;②生物安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;③吸取 0.5mL 无菌水打入冻干管,充分溶解菌粉后,打入平板中 200μL / 个,涂布均匀;④将平板置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。
参考用途 食品发酵、益生菌研究
常规保藏:
短期存放:斜面密封放 2–8℃,最多传 5 代,避免菌株变弱、毒力下降。
长期存放:用 20% 甘油制成菌液,放 - 80℃超低温冰箱,可稳定保存 2–5 年。
活化使用:冻干菌全部溶解后接种到 5% 羊血平板,37℃厌氧培养 24–48 小时,长得慢就多培养一段时间。
操作步骤:
1. 菌种复苏活化操作
从-80℃冰箱拿出冻存的GBS标准菌种,放在室温下快速化开。用灭菌后的接种环挑取一点菌液,按照四区划线的方法涂在5%脱纤维羊血琼脂平板上。把平板放进37℃培养箱,不用加二氧化碳,培养24到48个小时,长出的菌落如果是灰白色、圆润光滑、带有β溶血环,就是合格的GBS菌落。注意菌种传代不能超过5次,防止菌种变异、毒性变差、酶活性失效。
2. 临床样本增菌处理
采集好的阴道、直肠拭子以及血液、脑脊液等样本,要马上接种到LIM肉汤或者TransVag增菌肉汤里。放在37℃恒温环境培养18~24小时,肉汤里的抗生素能抑制杂菌生长,把样本里少量的GBS集中富集起来。不管后面要不要做核酸检测,都必须先做增菌培养,能大幅提高检测准确率,避免漏掉不溶血的GBS菌株。
3. 菌种纯化和初步检测
取培养好的增菌肉汤,划线涂在GBS显色培养基上,控制温度在35±2℃,培养18~24小时。挑取平板上蓝绿色、紫颜色的可疑菌落,做革兰氏染色,显微镜下看到链状排列的阳性球菌,基本符合GBS特征。再滴上3%过氧化氢,要是没有气泡,就说明不是葡萄球菌,完成初步的筛选鉴定。
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