苏云金芽孢杆菌天门亚种

商品属性：

产品名称	苏云金芽孢杆菌天门亚种	规格	冻干粉
英文名称	Bacillus thuringiensis subsp. tianmensis	货号	YS-JZ1606
生长条件	30℃；24-48h；好氧	用途	仅供科研

培养基 营养琼脂：蛋白胨：10.0，牛肉浸粉：3.0，氯化钠：5.0，琼脂：15.0，pH：7.0±0.2（25℃）
生长条件 30℃；24-48h；好氧；
形态 菌落直径为 2-4mm，灰白色，边缘不齐，不透明，表面粗糙，质地干燥，G＋（蓝紫色），杆菌（产伴孢晶体），纯度：纯
分离基物 土壤/昆虫
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述平板 1-2 块；②安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取 0.5mL 无菌水打入冻干管，充分溶解菌粉后，打入平板中 200μL / 个，涂布均匀；④将平板置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。
参考用途 质量控制菌株杀虫毒素与生防研究

常规保藏：
1、短期保藏条件：斜面培养基于 2–8℃密封保存，传代次数控制在 5 代以内，避免因多次传代引起遗传性状改变及毒力降低。
2、长期保藏条件：采用 20% 甘油菌液于 - 80℃超低温冻存，可稳定保藏 2–5 年，菌株活力与表型无显著改变。
3、活化操作要求：冻干菌株首次活化需完全溶解使用，接种于含 5% 脱纤维羊血的血琼脂平板，37℃厌氧培养 24–48 小时；对复苏延迟菌株可酌情延长培养时间。

操作步骤：
1. 菌株复苏活化操作
取出-80℃超低温冻存的GBS标准菌株（ATCC 13813等），于室温环境下快速解冻。采用无菌接种环挑取少许菌液，通过四区划线法接种至5%脱纤维羊血琼脂平板。将接种后的平板置于37℃恒温培养箱中静置培养24~48h，培养过程无需通入CO₂，待培养结束后观察菌落形态，合格菌落为灰白色、圆形光滑且呈现β-溶血特征。实验过程中严格管控菌株传代次数，确保不超过5代，有效防止菌株遗传变异、毒力衰减及酶活性缺失问题。
2. 临床样本选择性增菌处理
获取阴道拭子、直肠拭子、血液、脑脊液等临床GBS检测样本后，即刻接种至LIM肉汤或TransVag选择性增菌肉汤体系中。将样本培养液置于37℃恒温条件下孵育18~24h，借助肉汤中含有的庆大霉素、萘啶酸成分抑制杂菌生长，实现低浓度GBS菌株的富集浓缩。需严格遵循实验规范，即便后续开展核酸检测，也必须完成前置增菌步骤，该操作可大幅提升检测灵敏度，降幅可达90%以上，有效规避非溶血GBS菌株漏检情况。
3. 菌株分离纯化与初步鉴定
吸取完成增菌培养的肉汤样本，划线接种于GBS显色培养基平板，设置培养温度35±2℃，恒温孵育18~24h。培养结束后挑选平板上典型的蓝绿色、紫罗兰色可疑菌落，进行革兰氏染色显微镜检，GBS菌株镜下特征为革兰氏阳性、链状排列球菌。随后开展触酶试验，向菌落处滴加3%过氧化氢溶液，若无气泡产生，即可排除葡萄球菌属等触酶阳性杂菌，完成GBS初步筛选鉴定。

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