单增李斯特氏菌是可在低温下生长并引发严重感染的食源性病原菌,其核心检测原理围绕菌株的溶血素等毒力因子与低温适应特性展开,是食品安全风险监测与致病机制研究的重点菌株。
产品名称:
单增李斯特氏菌
英文名称:Listeria monocytogenes
规格:冻干粉
货号:YS-JZ1233
培养基 脑心浸液培养基(BHIA/BHIB):脑浸粉 5.0g,心浸粉12.5g,蛋白胨 5.0g,胰蛋白胨 10.0g,氯化钠 5.0g,葡萄糖 2.0g,磷酸氢二钠 2.5g,琼脂 20.0g(液体培养基不含),pH 7.4±0.2。121℃,15min灭菌。
生长条件 37℃;18-24h;好氧;
形态 菌落直径为1-2mm,圆形,边缘整齐,不透明,正面黄色,颜色较浅,中间凸起,表面光滑,表面明亮,质地湿润,易挑起,G+(蓝紫色),杆菌
模式菌株 no
操作步骤 ①准备1支含有5~10mL液体培养基的试管和2个平板;②安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;③吸取0.5mL液体培养基打入冻干管,充分溶解后重新打回液体试管中,混匀;④吸取0.2mL菌悬液打入平板中,涂布均匀,重复两次获得两个平板;⑤将液体试管和平板全部置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。
检测原理:
一、核心遗传背景基础原理
单增李斯特氏菌即单核增生李斯特菌(Listeria monocytogenes),为革兰氏阳性兼性厌氧杆菌,基因组携带hlyA、inlA等毒力基因簇,赋予其侵袭宿主细胞的能力,遗传性状稳定,毒力基因高度保守,是食品安全重点监测致病菌。
二、菌株检测与鉴定核心原理
以选择性增菌与分离培养,观察典型菌落及β-溶血,结合革兰氏染色与生化反应鉴定,再以hlyA等特异毒力基因分子扩增确证,实现"增菌分离—生化初筛—分子确认"的标准化鉴定流程。
公司正在出售的产品:
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甲状腺过氧化物酶(TPO)重组蛋白 |
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M2-型丙酮酸激酶(PKM2)重组蛋白 |
| 布氏犁头霉 |
糖原合酶激酶3α(GSK3a)重组蛋白 |
| 糙皮侧耳(平菇) |
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| 草螺菌属 |
氨基己糖苷酶Bβ(HEXb)重组蛋白 |
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激肽释放酶11(KLK11)重组蛋白 |
| 产黄纤维单胞菌 |
激肽释放酶10(KLK10)重组蛋白 |
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蛋白C(PROC)重组蛋白 |
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| 肠沙门氏菌肠亚种 |
岩藻糖苷酶αL1(FUCa1)重组蛋白 |
| 橙褐曲霉 |
微粒体谷胱甘肽S转移酶1(MGST1)重组蛋白 |
| 赤曲霉 |
糖原磷酸化酶L(PYGL)重组蛋白 |
| 肠炎沙门氏菌 |
岩藻糖基转移酶3(FUT3)重组蛋白 |
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蛋白二硫键异构酶(PDI)重组蛋白 |
| 纯黄丝衣霉 |
谷胱甘肽S转移酶π1(GSTp)重组蛋白 |
| 醋酸菌 |
颗粒酶K(GZMK)重组蛋白 |
冻干粉菌种复苏中注意事项:
1、冻干粉菌种低温保藏规范:未进行活化复苏的冻干菌种,长期储存环境温度需稳定维持在-20℃,可最大限度保留菌种休眠活性,延缓菌种失活。
2、冻干管使用规范:真空冷冻干燥封装的冻干菌种,其真空密封环境一旦破坏,菌粉极易受潮失活,因此开管后必须一次性完全使用,严禁留存备用。
3、菌种复苏规范:本冻干菌种采用牛奶作为冻干保护基质,有效菌体占比极低,复苏操作中需将全部重悬菌液接种于新鲜无菌培养基,杜绝部分接种,规避复苏失效问题。
4、菌种培养规范:休眠态冻干菌种复苏后存在明显生长延滞期,若未在说明书规定培养周期内观察到菌落生长,可在适配的温度、通气、光照等环境条件下延长培养时长。
5、菌种应用规范:初代复苏菌种生理活性、遗传性状尚未稳定,需经过两次连续继代培养,确认菌种生长状态稳定后,方可应用于各类科研、实验检测工作。
6、无菌操作规范:冻干管开启操作属于微生物专项操作,必须由专业实验人员执行;生物危害三级菌种需在二级及以上生物安全柜操作,常规标准菌种可在洁净超净台操作,全程落实个人防护,防止玻璃碎屑飞溅损伤眼部、面部。
7、实验消杀规范:菌种复苏全流程需在无菌净化设备内开展,实验结束后,所有接触菌种的器皿、废弃物必须经过彻底灭菌处理,合规无害化销毁。
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