商品属性:
| 产品名称 |
苏云金芽孢杆菌肯尼亚亚种 |
规格 |
冻干粉 |
| 英文名称 |
Bacillus thuringiensis subsp. kenyae |
货号 |
YS-JZ1603 |
| 生长条件 |
30℃;24-48h;好氧 |
用途 |
仅供科研 |
培养基 营养琼脂:蛋白胨:10.0,牛肉浸粉:3.0,氯化钠:5.0,琼脂:15.0,pH:7.0±0.2(25℃)
生长条件 30℃;24-48h;好氧;
形态 菌落直径为 2-4mm,灰白色,边缘不齐,不透明,表面粗糙,质地干燥,G+(蓝紫色),杆菌(产伴孢晶体),纯度:纯
分离基物 土壤/昆虫
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述平板 1-2 块;②安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;③吸取 0.5mL 无菌水打入冻干管,充分溶解菌粉后,打入平板中 200μL / 个,涂布均匀;④将平板置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。
参考用途 质量控制菌株杀虫毒素与生防研究
常规保藏:
短期保存:斜面培养物密封置于 2–8℃,严格控制传代次数≤5 代,避免遗传漂变与毒力减弱。
长期保存:制备 20% 甘油菌悬液,-80℃超低温冻存,可稳定保藏 2–5 年,表型与活性无明显变化。
活化步骤:冻干菌株全量溶解后接种,在 5% 羊血琼脂上 37℃厌氧培养 24–48 小时,复苏慢的菌株可延长培养。
操作步骤:
1. 菌株复苏活化(含性状质控)
合规取出-80℃超低温保存GBS标准菌株(ATCC 13813),室温快速解冻,全程恪守无菌操作规范。采用四区划线法将菌液接种至5%脱纤维羊血琼脂平板,37℃无CO₂条件下培养24~48h。菌落质控标准:合格菌落为灰白色、圆形光滑、β-溶血阳性。菌株传代质控:严格限制传代次数≤5代,防止菌株遗传性状、毒力及酶学特性发生改变,保障实验结果准确性。
2. 样本前处理增菌(含流程质控)
所有临床GBS检测样本(拭子、血液、脑脊液)采样后立即接种选择性增菌肉汤,37℃孵育18~24h。利用增菌肉汤的选择性抑菌体系,抑制杂菌生长、富集目标GBS菌株。核心质控要求:增菌步骤为强制性前置流程,全覆盖核酸检测、培养检测等所有检测方式,可提升90%以上检测灵敏度,规避非溶血GBS菌株漏检风险。
3. 分离纯化鉴定(含结果初筛质控)
增菌后样本划线接种GBS显色培养基,35±2℃培养18~24h。筛选显色特征菌落进行革兰氏染色镜检,质控形态为革兰氏阳性链状球菌。同步开展触酶试验,以3%过氧化氢为试剂,无气泡生成判定为触酶阴性,有效排除葡萄球菌属杂菌污染,完成合规性初步鉴定筛选。
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