脆弱拟杆菌是人体肠道中数量占优的共生厌氧菌,也是重要的条件致病菌,其核心检测原理围绕菌株的荚膜多糖与厌氧代谢特性展开,是肠道菌群研究与厌氧感染检验的代表菌株。
产品名称:
脆弱拟杆菌
英文名称:Bacteroides fragilis
规格:冻干粉
货号:YS-JZ1224
培养基 特殊蛋白胨:23.0,可溶性淀粉:1.0,氯化钠:5.0,琼脂:10.0,脱纤维羊血:5%(50℃添加),pH:7.3±0.2(25℃)
生长条件 37℃;24-48h;厌氧;
形态 菌落直径为1-2mm,圆形,边缘整齐,不透明,正面灰白色,中间凸起,表面光滑,表面明亮,质地湿润,易挑起,G-(红),杆菌,纯度:纯
分离基物 阑尾脓肿
模式菌株 yes
操作步骤 ①准备上述平板 1-2 块(提前置于厌氧环境除氧 24h);②安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;③吸取 0.5mL 无菌水(提前置于厌氧环境除氧 24h)打入冻干管,充分溶解菌粉后,打入平板中 200μL/个,涂布均匀;④将平板置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。
检测原理:
一、核心遗传背景基础原理
脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)为革兰氏阴性专性厌氧杆菌,人体肠道正常菌群成员,基因组携带大量糖利用与多糖降解相关基因,具荚膜多糖合成基因,遗传性状稳定,厌氧生长特性与生化性状传代保持,为鉴定提供稳定基础。
二、菌株检测与鉴定核心原理
在厌氧条件下培养分离,以革兰氏染色观察阴性杆菌形态,结合生化反应(糖发酵、胆汁耐受、触酶等)鉴定,必要时以16S rRNA基因序列分析确证,实现"厌氧分离—生化初筛—分子确认"的鉴定流程。
公司正在出售的产品:
| 变形杆菌定量菌株 |
激肽释放酶5(KLK5)重组蛋白 |
| 病牛沙门氏菌 |
蛋白激酶R(PKR)重组蛋白 |
| 伯顿丝孢毕赤酵母 |
尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)重组蛋白 |
| 布兰克假丝酵母 |
血红素氧合酶1(HO1)重组蛋白 |
| 布氏乳杆菌 |
铜伴侣超氧化物歧化酶重组蛋白 |
| 糙孢曲霉 |
解整合素金属蛋白酶8(ADAM8)重组蛋白 |
| 草本枝孢 |
胱天蛋白酶3(CASP3)重组蛋白 |
| 草剃绿僵菌 |
微粒体谷胱甘肽S转移酶2(MGST2)重组蛋白 |
| 蝉花1-13 |
葡萄糖激酶(GCK)重组蛋白 |
| 产黄纤维单胞菌 |
激肽释放酶6(KLK6)重组蛋白 |
| 产气柯林斯氏菌 |
脆弱拟杆菌肝素酶(HPSE)重组蛋白 |
| 产酸克雷伯氏菌 |
Toll样受体4(TLR4)重组蛋白 |
| 肠拟杆菌 |
胱天蛋白酶3(CASP3)重组蛋白 |
| 成团泛菌 |
丙酮酸脱氢酶α(PDHA1)重组蛋白 |
| 产酸拟杆菌 |
碳酸酐酶Ⅰ(CA1)重组蛋白 |
| 肠炎沙门氏菌亚种 |
血管性血友病因子裂解蛋白酶(vWFCP)重组蛋白 |
| 赤曲霉 |
泛素结合酶E2A(UBE2A)重组蛋白 |
| 刺囊毛霉 |
非组织特异性碱性磷酸酶(ALPL)重组蛋白 |
冻干粉菌种复苏中注意事项:
1、冻干粉菌种在未启动活化实验、计划长期存放的前提下,建议置于-20℃恒温环境保存,可有效避免菌种活性衰减。
2、得益于真空冷冻干燥工艺,菌种可长期休眠保存,但冻干管开启后真空环境消失,菌粉易受污染、失活,因此单次开管必须一次性用完所有菌粉,不可留存下次使用。
3、冻干制剂中牛奶保护剂为主要成分,功能性菌体含量较少,若复苏时仅接种部分菌悬液,会因菌体数量不足导致无法正常生长,因此需全部接种至新鲜培养基。
4、长期休眠的冻干菌种复苏适应周期较长,属于正常现象,若标准培养时间内无菌落萌发,无需判定菌种失效,可延长培养24小时甚至更久等待生长。
5、刚复苏的初代菌种生长性能不稳定,存在活性波动,行业通用标准为连续继代培养2次,待菌种生长特性、代谢活性稳定后,方可投入实验使用。
6、冻干管开启操作具备一定专业性和风险性,非专业人员禁止操作;分级开展无菌作业:三级生物风险菌种需在生物安全柜操作,普通菌种可在超净台操作,开管时重点做好面部防护。
7、菌种复苏、开管的全部操作场景需为无菌净化环境,实验结束后所有实验器具、耗材不得随意丢弃,必须经高压灭菌消毒后统一销毁。
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