商品属性:
| 产品名称 |
嗜热脂肪地芽孢杆菌 |
规格 |
冻干粉 |
| 英文名称 |
Geobacillus stearothermophilus |
货号 |
YS-JZ1583 |
| 生长条件 |
55℃;24-48h;好氧 |
用途 |
仅供科研 |
培养基 营养琼脂:蛋白胨:10.0,牛肉浸粉:3.0,氯化钠:5.0,琼脂:15.0,pH:7.0±0.2(25℃)
生长条件 55℃;24-48h;好氧;
形态 菌落直径为 1-3mm,乳白色,圆形,边缘不齐,不透明,表面略粗糙,质地干燥,G+(蓝紫色),杆菌(产芽孢),纯度:纯
分离基物 温泉土壤
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述平板 1-2 块;②安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;③吸取 0.5mL 无菌水打入冻干管,充分溶解菌粉后,打入平板中 200μL / 个,涂布均匀;④将平板置于上述高温培养条件下培养,菌种长出即可使用。
参考用途 质量控制菌株高温酶与生物指示剂研究
常规保藏:
1、短期保藏要求:斜面培养基密封后在 2-8℃条件下贮存,传代次数严格控制在 5 代以内,防止多次传代导致菌株遗传特性改变、毒力减弱。
2、长期保藏要求:以 20% 甘油菌液形式在 - 80℃超低温冰箱冻存,可稳定保藏 2-5 年,菌株活力与表型无明显变化。
3、活化操作要求:冻干菌株首次活化须全部溶解使用,接种于含 5% 脱纤维羊血的血琼脂平板,37℃厌氧培养 24-48 小时,对生长延迟菌株适当延长培养时间。
操作步骤:
1. 菌株复苏活化操作
取出-80℃超低温冻存的GBS标准菌株(ATCC 13813等),于室温环境下快速解冻。采用无菌接种环挑取少许菌液,通过四区划线法接种至5%脱纤维羊血琼脂平板。将接种后的平板置于37℃恒温培养箱中静置培养24~48h,培养过程无需通入CO₂,待培养结束后观察菌落形态,合格菌落为灰白色、圆形光滑且呈现β-溶血特征。实验过程中严格管控菌株传代次数,确保不超过5代,有效防止菌株遗传变异、毒力衰减及酶活性缺失问题。
2. 临床样本选择性增菌处理
获取阴道拭子、直肠拭子、血液、脑脊液等临床GBS检测样本后,即刻接种至LIM肉汤或TransVag选择性增菌肉汤体系中。将样本培养液置于37℃恒温条件下孵育18~24h,借助肉汤中含有的庆大霉素、萘啶酸成分抑制杂菌生长,实现低浓度GBS菌株的富集浓缩。需严格遵循实验规范,即便后续开展核酸检测,也必须完成前置增菌步骤,该操作可大幅提升检测灵敏度,降幅可达90%以上,有效规避非溶血GBS菌株漏检情况。
3. 菌株分离纯化与初步鉴定
吸取完成增菌培养的肉汤样本,划线接种于GBS显色培养基平板,设置培养温度35±2℃,恒温孵育18~24h。培养结束后挑选平板上典型的蓝绿色、紫罗兰色可疑菌落,进行革兰氏染色显微镜检,GBS菌株镜下特征为革兰氏阳性、链状排列球菌。随后开展触酶试验,向菌落处滴加3%过氧化氢溶液,若无气泡产生,即可排除葡萄球菌属等触酶阳性杂菌,完成GBS初步筛选鉴定。
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