肠产毒性大肠埃希氏菌是引起旅行者腹泻的重要致泻病原菌,其核心检测原理围绕菌株的肠毒素与定殖因子抗原展开,是食品安全与腹泻病防控研究的重点菌株。
产品名称:
肠产毒性大肠埃希氏菌
英文名称:Escherichia coli ETEC
规格:冻干粉
货号:YS-JZ1198
培养基 蛋白胨:10.0g,牛肉粉:3.0g,氯化钠:5.0g,琼脂:15.0g,pH值:7.3±0.1(25℃)
生长条件 37℃;18-24h;好氧;
形态 单菌落大小1-2mm,形状圆形,边缘整齐,不透明,颜色灰白色,中间凸起。
分离基物 腹泻病例粪便标本
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述平板 1-2 块;②安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;③吸取 0.5mL 无菌水打入冻干管,充分溶解菌粉后,分别打入两块平板,每块平板打入约200μL,涂布均匀;④将平板置于上述培养条件下培养,菌种长出即可使用。
检测原理:
一、核心遗传背景基础原理
肠产毒性大肠埃希氏菌(ETEC)是致病性大肠杆菌核心亚型,基因组拥有大肠杆菌保守遗传背景,特异性携带热稳定、热不稳定肠毒素编码基因簇,为该亚型专属遗传标记。菌株基础生长、生化性状与普通大肠杆菌一致,毒力基因高度保守,传代不易缺失,与侵袭性、致病性大肠杆菌等亚型基因差异显著,为分型检测提供核心依据。
二、菌株检测与鉴定核心原理
肠产毒性大肠埃希氏菌检测分为基础菌种鉴定与亚型分型两步。首先通过常规生化试验确认大肠埃希氏菌菌种属性,再通过特异性PCR扩增肠毒素专属毒力基因,结合分子测序验证,精准区分产毒性亚型与其他致病亚型,实现肠道致病大肠杆菌的精准分型与病原筛查。
公司正在出售的产品:
| 棒状杆菌属 |
丝氨酸蛋白酶1(PRSS1)重组蛋白 |
| 鲍氏不动杆菌 |
麦芽糖酶糖化酶(MGAM)重组蛋白 |
| 贝氏不动杆菌 |
谷胱甘肽过氧化酶1(GPX1)重组蛋白 |
| 壁霉素游动放线菌 |
基质金属蛋白酶15(MMP15)重组蛋白 |
| 蝙蝠蛾拟青霉菌 |
脂蛋白脂酶(LPL)重组蛋白 |
| 变色栓菌(云芝) |
钙非依赖性磷脂酶A2(iPLA2)重组蛋白 |
| 变形杆菌定量菌株 |
蛋白激酶Cε(PKCe)重组蛋白 |
| 波茨坦短芽孢杆菌 |
内皮素转化酶1(ECE1)重组蛋白 |
| 不动杆菌属 |
磷脂酶A2激活蛋白(PLAP)重组蛋白 |
| 苍白黄杆菌 |
糖原合酶激酶3α(GSK3a)重组蛋白 |
| 草剃绿僵菌 |
肠产毒性大肠埃希氏菌胱天蛋白酶3(CASP3)重组蛋白 |
| 蝉花1-13 |
髓过氧化物酶(MPO)重组蛋白 |
| 产红青霉 |
蛋白激酶Cε(PKCe)重组蛋白 |
| 产气肠杆菌 |
谷胱甘肽S转移酶α4(GSTA4)重组蛋白 |
| 蟾分枝杆菌 |
转甲状腺素蛋白(PALB)重组蛋白 |
| 产碱普罗菲登斯菌 |
丙酮酸脱氢酶α(PDHA1)重组蛋白 |
| 产色葡萄球菌 |
胱天蛋白酶8(CASP8)重组蛋白 |
| 肠炎沙门氏菌 |
二氢硫辛酸脱氢酶(DLD)重组蛋白 |
冻干粉菌种复苏中注意事项:
1、针对未开展活化复苏的冻干粉菌种,长期保藏的最优条件为-20℃低温环境,可有效维持菌种休眠活性。
2、冻干菌种采用真空冷冻干燥工艺制备封存,菌体处于密闭休眠状态,开启后的冻干管菌粉无法二次保存,必须一次性用完。
3、该类冻干粉载体主要为牛奶保护剂,有效菌体占比较少,复苏时不得留存菌悬液,需全部接种于新鲜无菌培养基,保证复苏成功率。
4、休眠态冻干菌种复苏后存在生长延迟现象,若未达到说明书培养时长仍无菌落生长,可顺延培养时间,持续培养24小时甚至更久,观察菌落生长情况。
5、初代复苏菌种活性波动较大,不具备实验稳定性,需完成两次继代传代培养,待菌种生理活性稳定后,方可投入后续实验使用。
6、冻干管开启属于专业微生物操作,仅限持证专业人员执行;依据菌种生物危害等级,三级危害菌种需在生物安全柜操作,常规标准菌种可在超净台操作,操作全程规范佩戴防护用具,规避眼部、面部损伤风险。
7、菌种复苏全流程操作需在无菌净化设备内完成,实验结束后所有接触菌种的器皿、耗材,必须经过高压灭菌处理,合规销毁,杜绝生物污染。
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