商品属性:
| 产品名称 |
生孢梭菌 |
规格 |
冻干粉 |
| 英文名称 |
Clostridium sporogenes |
货号 |
YS-JZ1563 |
| 生长条件 |
37℃;48-72h;严格厌氧 |
用途 |
仅供科研 |
培养基 强化梭菌培养基(RCM):蛋白胨:10.0,牛肉浸粉:10.0,酵母提取物:3.0,葡萄糖:5.0,氯化钠:5.0,可溶性淀粉:1.0,半胱氨酸盐酸盐:0.5,乙酸钠:3.0,琼脂:13.5,pH:7.2±0.2(25℃)
生长条件 37℃;48-72h;严格厌氧;
形态 菌落直径为 1-2mm,灰白色,半透明,圆形,边缘不齐,不透明,表面略粗糙,G+(蓝紫色),梭菌(产芽孢),纯度:纯
分离基物 动物肠道
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述厌氧平板 1-2 块;②厌氧安全柜中打开,用酒精灯灼烧顶部,后迅速滴上无菌水使之破裂,随后用镊子将其敲碎;③吸取 0.5mL 无菌水打入冻干管,充分溶解菌粉后,打入平板中 200μL / 个,涂布均匀;④将平板置于厌氧培养罐内上述条件培养,菌种长出即可使用。
参考用途 质量控制菌株厌氧微生物与毒素研究
常规保藏:
1、短期保藏策略:斜面密封置于 2-8℃条件保存,严格限制传代次数≤5 代,降低遗传漂变、菌株性状退化风险。
2、长期保藏策略:采用 20% 甘油作为保护剂制备菌液,-80℃超低温冻存,可实现 2-5 年稳定保藏,菌株生理活性无显著改变。
3、活化处理流程:冻干菌株全量复溶后接种,在 5% 脱纤维羊血琼脂平板上 37℃厌氧培养 24-48 小时,复苏迟缓菌株可酌情延长培养时间。
操作步骤:
1. 菌株复苏活化
室温快速融化-80℃冻存GBS标准菌株,无菌接种环取菌液四区划线接种5%脱纤维羊血琼脂平板。37℃无CO₂条件下培养24~48h,观察灰白色、β-溶血光滑圆形菌落。菌株传代严格≤5代,杜绝遗传性状及活性丢失。
2. 样本增菌预处理
临床各类GBS样本即时接种LIM或TransVag选择性增菌肉汤,37℃恒温孵育18~24h,通过抗生素抑制杂菌、富集目标菌株。所有核酸检测样本均需前置增菌,显著提升检出率,避免非溶血菌株漏检。
3. 分离纯化与初筛鉴定
增菌后肉汤划线接种GBS显色培养基,35±2℃培养18~24h。选取特征性蓝绿、紫罗兰可疑菌落,经革兰氏染色确认阳性链状球菌,再行3%过氧化氢触酶试验,无气泡即为触酶阴性,完成初步鉴定筛选。
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