草螺菌属是能定殖于禾本科植物内部的固氮菌属,其核心检测原理围绕菌株的植物内生定殖与固氮能力展开,常用于植物促生菌与生物固氮研究。
产品名称:
草螺菌属
英文名称:Herbaspirillum sp.
规格:冻干粉
货号:YS-JZ1181
培养基 特殊蛋白胨:23.0g,可溶性淀粉:1.0g,氯化钠:5.0g,琼脂:10.0g,脱纤维羊血:5%(50℃添加),pH:7.3±0.2(25℃)
生长条件 37°C;48-72h;5%CO2
形态 菌落直径为1-2mm,圆形,边缘整齐,不透明,正面灰白色,中间凸起,表面光滑,表面明亮,质地湿润,易挑起,G-(红),杆菌,纯度:纯
模式菌株 no
操作步骤 ①准备上述平板 1-2 块;②平板表面消毒后在安全柜中打开;③吸取 1-3ml 无菌水打入平板中,用无菌涂布棒在平板表层来回刮取菌苔,制成菌悬液;④用巴氏吸管吸取菌悬液,打入到新鲜的平板上,涂布均匀;⑤将平板置于上述培养条件下培养即可。
检测原理:
一、核心遗传背景基础原理
草螺菌属为植物内生革兰氏阴性杆菌,基因组拥有该菌属保守16S rRNA基因序列,具备属内专属核心遗传特征,遗传性状稳定。菌株核心特性为可定殖于植物组织、固氮促生,相关功能基因簇高度保守,传代无功能性状丢失。菌属生长特性、代谢模式统一,与其他植物内生细菌差异显著,为菌属水平的筛查鉴定提供稳定遗传基础。
二、菌株检测与鉴定核心原理
草螺菌属检测采用特异性培养结合分子菌属鉴定原理。依托植物内生细菌专属培养基富集培养,结合菌株内生定殖、微需氧生长特性完成初步筛选。通过扩增细菌16S rRNA保守序列,比对数据库实现草螺菌属的精准定性,可区分其他植物内生杆菌,适用于植物微生物样本的菌属筛查与鉴定。
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冻干粉菌种复苏中注意事项:
1、冻干粉菌种低温保藏规范:未进行活化复苏的冻干菌种,长期储存环境温度需稳定维持在-20℃,可最大限度保留菌种休眠活性,延缓菌种失活。
2、冻干管使用规范:真空冷冻干燥封装的冻干菌种,其真空密封环境一旦破坏,菌粉极易受潮失活,因此开管后必须一次性完全使用,严禁留存备用。
3、菌种复苏规范:本冻干菌种采用牛奶作为冻干保护基质,有效菌体占比极低,复苏操作中需将全部重悬菌液接种于新鲜无菌培养基,杜绝部分接种,规避复苏失效问题。
4、菌种培养规范:休眠态冻干菌种复苏后存在明显生长延滞期,若未在说明书规定培养周期内观察到菌落生长,可在适配的温度、通气、光照等环境条件下延长培养时长。
5、菌种应用规范:初代复苏菌种生理活性、遗传性状尚未稳定,需经过两次连续继代培养,确认菌种生长状态稳定后,方可应用于各类科研、实验检测工作。
6、无菌操作规范:冻干管开启操作属于微生物专项操作,必须由专业实验人员执行;生物危害三级菌种需在二级及以上生物安全柜操作,常规标准菌种可在洁净超净台操作,全程落实个人防护,防止玻璃碎屑飞溅损伤眼部、面部。
7、实验消杀规范:菌种复苏全流程需在无菌净化设备内开展,实验结束后,所有接触菌种的器皿、废弃物必须经过彻底灭菌处理,合规无害化销毁。
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