产品详情:

产品名称:
Recombinant Rat Ripk3 protein,N-His Tag
英文全称:Recombinant Rat Ripk3 protein,N-His Tag
纯度(Purity):>90% as determined by SDS-PAGE
内毒素(Endotoxin level):Please contact with the lab for this information.
蛋白构建(Construction):A DNA sequence encoding Rattus norvegicus Ripk3 (Met1-Asp518) was fused with the N-terminal His Tag
表达宿主(Host):Mammalian cells
种属(Species):Rattus norvegicus
预测分子量(Predicted Molecular Mass):58.32 kDa
制剂(Formulation):Supplied as solution form in PBS or lyophilized from PBS .
运输方式(Shipping):In general, proteins are provided as lyophilized powder/frozen liquid. They are shipped out with dry ice/blue ice unless customers require otherwise.
稳定性&储存(Stability &Storage):Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze thaw cycles.
Store at 2 to 8 °C for one week .
Store at -20 to -80 °C for twelve months from the date of receipt.
复溶(Reconstitution):Reconstitute in sterile water for a stock solution.A copy of datasheet will be provided with the products, please refer to it for details.
电泳图(SDS-PAGE image)
背景(Background)
分子别名(Alternative Names):Ripk3,RIP3.
Note:For research use only .
核心作用:

该分子具备多重生物学功能。在肿瘤调控层面,可选择性诱发各类肿瘤细胞发生凋亡,阻滞肿瘤细胞增殖进程;通过抑制抗凋亡因子 Bcl-2,激活线粒体凋亡信号轴,同时阻断肿瘤血管生成以限制肿瘤进展。
在免疫调控层面,分子可与 IL20R1/IL20R2、IL22R1/IL20R2 形成的受体复合物相结合,进而启动 JAK1/STAT3、MAPK 信号级联反应,刺激外周血单个核细胞合成与分泌 IL-6、TNF-α、IFN-γ 等促炎因子。
在抗感染与细胞稳态层面,面对流感病毒感染能够启动 I 型干扰素免疫应答;参与内质网稳态维持,作为泛素蛋白酶体系统质控元件,识别蛋白酶体功能损伤并激活 PKR/EIF2AK2 通路。
操作步骤:

一、开盖前准备
从储存环境中取出蛋白冻干粉,置于 4℃环境平衡 30 分钟;
12000 rpm 低温离心 5 分钟,将瓶壁及管盖附着的蛋白粉末全部甩至管底;
确认粉末完全沉降后再开盖,避免蛋白损失。
二、蛋白复溶
加入无菌蒸馏水,将蛋白配制成 0.1~0.5 mg/mL 的溶液,浓度不低于 0.1 mg/mL;
室温静置 5~10 分钟,使冻干粉自然溶解;
全程避免剧烈涡旋或反复吹打,防止蛋白变性失活。
三、亲和纯化(适配 C-His 标签)
用预冷的 PBS 缓冲液平衡 Ni-NTA 亲和层析柱;
复溶后的蛋白溶液以 0.5 mL/min 流速上样,使 His 标签与镍柱充分结合;
用含 30 mM 咪唑的缓冲液洗去非特异性结合杂蛋白;
用含 250 mM 咪唑的缓冲液洗脱目标蛋白,分段收集洗脱峰。
四、分装与储存
洗脱后的蛋白经 0.22 μm 滤膜除菌过滤;
按单次实验用量分装至无菌冻存管;
添加 0.1% BSA 或 5% 海藻糖作为稳定剂;
置于 - 20~-80℃环境冻存,全程避免反复冻融。
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