小鼠原代肺微血管周细胞专用培养基

商品属性：

产品名称	小鼠原代肺微血管周细胞专用培养基
规格	100mL/500mL
货号	YS-XP8837

产品介绍：

小鼠原代肺微血管周细胞专用培养基由团队精心优化，经过长期测试，本产品可保持小鼠原代肺微血管周细胞最佳的生长状态。
本产品中已包含小鼠原代肺微血管周细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于小鼠原代肺微血管周细胞的培养。
产品主要成分：

名称	体积	浓度	保存条件
原代周细胞基础培养基	500mL	1×	4℃、避光
原代周细胞培养添加剂	5mL	100×	-20℃、避光
胎牛血清（FBS）	50mL	终浓度10%	-20℃、避光
双抗（青霉素/链霉素，P/S）	5mL	100×	-20℃、避光

运输和保存：

运输：放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输
保存方法：按照对应保存条件保存12个月，配置好的完全培养基2℃～8℃,保存2个月；
质量控制：

运输与保存:
运输条件：
新鲜细胞：T25瓶充液运输，需检查是否漏液，收到后立即静置2-3小时再操作。
冻存细胞：干冰运输，建议保存于液氮或-80℃冰箱，或直接复苏。
保存建议：
冻存细胞长期保存需液氮；新鲜细胞建议尽快传代或实验。
细胞处理步骤
接收检查：
显微镜下观察细胞状态（推荐4X物镜），确认无污染。
如发现污染或异常，需在3天内联系供应商并提供照片。
复苏/传代：
冻存细胞复苏后离心重悬，接种于预包被的培养器皿。
新鲜细胞弃原培养基，更换为含5%胎牛血清、1%双抗的内皮细胞专用培养基。
注意事项:
仅限科研使用，不可用于临床诊断或治疗。
操作需在无菌条件下进行，避免反复冻融。
细胞培养操作步骤：

1‌、细胞复苏‌（适用于冻存细胞）：
将含细胞的冻存管在 ‌37℃水浴‌ 中快速摇晃解冻（约1-2分钟）。
转移至含 ‌5mL完全培养基‌ 的离心管中，混匀。
‌1000RPM离心5分钟‌，弃上清，加入4-6mL新鲜完全培养基重悬细胞。
接种至T25培养瓶或6cm皿中，放入 ‌37℃、5%CO₂培养箱‌ 培养过夜。
第二天换液并观察细胞贴壁情况。
2‌、日常培养与换液‌：
使用该专用培养基直接进行细胞培养，无需额外添加成分。
‌每2-3天更换一次培养基‌，避免营养耗尽或代谢物积累影响细胞状态。
‌3、细胞传代‌（当细胞密度达80%-90%时）：
弃去旧培养基，用无钙镁离子的PBS轻柔润洗1-2次。
加入 ‌0.25%胰蛋白酶消化液‌（含EDTA），于37℃消化1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落。
加入含10%血清的完全培养基终止消化，轻柔吹打使细胞完全脱落。
离心（1000RPM，8-10分钟），弃上清，重悬后按 ‌1:2至1:5比例‌ 分瓶传代。
4、细胞冻存‌：
选择生长状态良好的细胞，离心后弃上清。
加入适量无血清冻存液（含DMSO），重悬后分装至冻存管。
采用程序降温法或使用冻存盒，于 ‌-80℃过夜后转移至液氮‌ 长期保存。
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