小鼠原代腹腔主动脉外膜成纤维细胞培养基

商品属性：

产品名称	小鼠原代腹腔主动脉外膜成纤维细胞专用培养基
规格	100mL/500mL
货号	YS-XP8752

 产品介绍：

小鼠原代腹腔主动脉外膜成纤维细胞专用培养基由团队精心优化，经过长期测试，本产品可保持小鼠原代腹腔主动脉外膜成纤维细胞最佳的生长状态。
本产品中已包含小鼠原代腹腔主动脉外膜成纤维细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用小鼠原代腹腔主动脉外膜成纤维细胞的培养。
产品主要成分：

名称	体积	浓度	保存条件
原代成纤维细胞基础培养基	500mL	1×	4℃、避光
原代成纤维细胞培养添加剂	5mL	100×	-20℃、避光
胎牛血清（FBS）	50mL	终浓度10%	-20℃、避光
双抗（青霉素/链霉素，P/S）	5mL	100×	-20℃、避光

 运输和保存：

运输：放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输
保存方法：按照对应保存条件保存12个月，配置好的完全培养基2℃～8℃,保存2个月；
质量控制：

运输与保存:
运输条件：
新鲜细胞：T25瓶充液运输，需检查是否漏液，收到后立即静置2-3小时再操作。
冻存细胞：干冰运输，建议保存于液氮或-80℃冰箱，或直接复苏。
保存建议：
冻存细胞长期保存需液氮；新鲜细胞建议尽快传代或实验。
细胞处理步骤
接收检查：
显微镜下观察细胞状态（推荐4X物镜），确认无污染。
如发现污染或异常，需在3天内联系供应商并提供照片。
复苏/传代：
冻存细胞复苏后离心重悬，接种于预包被的培养器皿。
新鲜细胞弃原培养基，更换为含5%胎牛血清、1%双抗的内皮细胞专用培养基。
注意事项:
仅限科研使用，不可用于临床诊断或治疗。
操作需在无菌条件下进行，避免反复冻融。
细胞培养操作步骤：

1‌、细胞复苏‌（适用于冻存细胞）：
将含细胞的冻存管在 ‌37℃水浴‌ 中快速摇晃解冻（约1-2分钟）。
转移至含 ‌5mL完全培养基‌ 的离心管中，混匀。
‌1000RPM离心5分钟‌，弃上清，加入4-6mL新鲜完全培养基重悬细胞。
接种至T25培养瓶或6cm皿中，放入 ‌37℃、5%CO₂培养箱‌ 培养过夜。
第二天换液并观察细胞贴壁情况。
2‌、日常培养与换液‌：
使用该专用培养基直接进行细胞培养，无需额外添加成分。
‌每2-3天更换一次培养基‌，避免营养耗尽或代谢物积累影响细胞状态。
‌3、细胞传代‌（当细胞密度达80%-90%时）：
弃去旧培养基，用无钙镁离子的PBS轻柔润洗1-2次。
加入 ‌0.25%胰蛋白酶消化液‌（含EDTA），于37℃消化1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落。
加入含10%血清的完全培养基终止消化，轻柔吹打使细胞完全脱落。
离心（1000RPM，8-10分钟），弃上清，重悬后按 ‌1:2至1:5比例‌ 分瓶传代。
4、细胞冻存‌：
选择生长状态良好的细胞，离心后弃上清。
加入适量无血清冻存液（含DMSO），重悬后分装至冻存管。
采用程序降温法或使用冻存盒，于 ‌-80℃过夜后转移至液氮‌ 长期保存。
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