小鼠基质金属蛋白酶10(MMP-10)试剂盒
检测原理:
目前市面上绝大多数小鼠 MMP-10 ELISA 试剂盒采用的是双抗体夹心法(Sandwich-ELISA)。其基本反应原理如下:
包被:酶标板上预先包被了特异性的抗小鼠 MMP-10 单克隆抗体(捕获抗体)。
结合:加入待测样本或标准品后,样本中的 MMP-10 抗原会与板上的捕获抗体特异性结合。
形成复合物:洗去未结合的物质后,加入酶标记(通常为辣根过氧化物酶 HRP)的抗小鼠 MMP-10 抗体(检测抗体),它与已结合的 MMP-10 抗原结合,形成“抗体-抗原-酶标抗体”的免疫复合物。
酶联显色:加入显色底物(如 TMB),HRP 催化底物显蓝色。
终止与检测:加入终止液(通常为硫酸)使反应终止,溶液颜色由蓝变黄。使用酶标仪在 450 nm 波长下测定各孔的光密度值(OD值)。样本中 MMP-10 的浓度与 OD 值呈正比,通过绘制标准曲线即可计算出样本中 MMP-10 的具体浓度。
产品名称:
小鼠基质金属蛋白酶10(MMP-10)试剂盒
英文名称:Mouse matrix metalloproteinase 10,MMP-10 ELISA kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E032372
用途:仅供科研研究实验
核心概览:
检测范围 灵敏度 适用样本类型
12.5 - 400 pg/mL 6.25 pg/mL 血清、血浆、细胞上清、组织匀浆
其他常见性能指标:
特异性:优质的试剂盒对小鼠 MMP-10 具有高敏感性,且与其他结构类似的基质金属蛋白酶(MMPs)无明显交叉反应。
精密度:
批内差 (Intra-assay CV):通常 < 10%。
批间差 (Inter-assay CV):通常 < 12%。
适用样本类型:
该试剂盒适用于多种生物样本,主要包括:
血清
血浆(如EDTA、肝素抗凝)
细胞培养上清液
组织匀浆
细胞裂解液
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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