小鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒
检测原理:
1. 双抗体夹心法(部分高敏T3或u-T3、FT3试剂盒采用)
基本流程:酶标板上预先包被了抗小鼠T3的捕获抗体。加入待测样本或标准品后,样本中的T3与捕获抗体结合。随后加入HRP(辣根过氧化物酶)标记的检测抗体(或生物素化抗体+HRP标记的亲和素),形成“捕获抗体-T3抗原-酶标检测抗体”的免疫复合物。
结果判定:加入底物TMB显色,颜色的深浅与样本中T3的浓度呈正相关。
产品名称:
小鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA试剂盒
英文名称:Mouse Tri-iodothyronine,T3 ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E032135
用途:仅供科研研究实验
核心概览:
检测范围 0.25 - 7.5 ng/mL;123.46 - 10000 pg/mL
灵敏度 通常 < 0.4 ng/mL(或最低可测 47.4 pg/mL)
特异性 对小鼠天然或重组T3具有高灵敏度和优异特异性,未观察到与其他类似物有显著交叉反应
重复性 板内变异系数(CV)< 10%,板间变异系数(CV)< 15%
反应种属 小鼠(Mouse)或 小鼠/大鼠(Mouse/Rat)
适用样本 血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清液等
检测流程简要:
第一阶段:准备工作 (Pre-preparation)
试剂回温:从冰箱取出试剂盒,将所有试剂(包括浓缩洗涤液、标准品、样本等)在室温(20-25℃)下平衡至少 30分钟。
注意:如果浓缩洗涤液有结晶,需置于37℃水浴助溶并混匀。
标准品稀释:按照说明书a要求,使用专用稀释液对标准品进行梯度稀释(通常做7-8个浓度点),现配现用。
样本处理:确保血清、血浆或细胞上清液澄清无沉淀(如有沉淀需再次离心)。
第二阶段:加样与孵育
加样:
在酶标板的对应孔中,分别加入 100 µL(具体体积看说明书)稀释好的标准品和待测样本。
设置空白孔(只加稀释液)。
建议:每个样本做2-3个复孔,数据更可靠。
孵育:
盖上封板膜,放入 37℃ 恒温箱孵育 1-2小时(或按说明书要求,如室温2小时)。
原理:让样本中的抗原与板上的捕获抗体结合。
第三阶段:洗板与检测抗体
洗板(关键步骤):
弃去孔内液体,每孔加满洗涤液(约300-350 µL),静置浸泡 30-60秒 后甩干。
重复洗涤 3-5次。最后一次需在吸水纸上用力拍干,确保无残留液体。
加检测抗体:
每孔加入 100 µL 稀释好的检测抗体工作液(生物素化抗体)。
盖上封板膜,37℃ 孵育 1小时。
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注意事项:
标准曲线:每次实验都必须重新制作标准曲线,不可沿用旧数据。
洗涤步骤:洗涤不充分是导致误差的主要原因,需严格按照说明书洗板(通常3-5次)。
用途限制:此类试剂盒通常仅供科研使用,不可用于临床诊断
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