小鼠胎球蛋白A(Fetuin A)ELISA试剂盒

检测原理：
小鼠Fetuin A ELISA试剂盒普遍采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）进行定量检测，具体反应原理如下：
包被与结合：试剂盒的酶标包被板上预先包被了特异性识别小鼠Fetuin A的捕获抗体（通常为单克隆抗体）。当加入标准品或待测样本时，样本中的Fetuin A会与固相载体上的抗体特异性结合。
形成复合物：洗涤除去未结合的成分后，加入酶标记的检测抗体（通常为HRP标记，或生物素标记抗体与亲和素-酶复合物）。它会与已经结合在板上的Fetuin A结合，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物。
显色反应：再次彻底洗涤后，加入显色底物（通常为TMB）。在辣根过氧化物酶（HRP）的催化下，TMB转化为蓝色产物，加入终止液（酸性溶液）后变为黄色。
定量分析：颜色的深浅与样本中小鼠Fetuin A的浓度呈正相关。使用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过绘制标准曲线即可计算出样本中Fetuin A的实际浓度。
产品名称：小鼠胎球蛋白A(Fetuin A)ELISA试剂盒
英文名称：Mouse Fetuin A ELISA Kit
规格：48T/96T
货号：LZ-E032076
用途：仅供科研研究实验
核心概览：
检测范围（线性范围）：跨度较大，常见的有 3.125 ng/mL 至 200 ng/mL，也有部分试剂盒的范围在 62.5 ng/mL 至 2000 ng/mL，甚至部分高灵敏度试剂盒的检测范围在 0.625 ng/mL 至 40 ng/mL（即 625 pg/mL - 40000 pg/mL）。
灵敏度：能够检测到的最小浓度差异较大，一般在 < 10 ng/mL 左右，部分高灵敏度试剂盒可达到 < 1.0 ng/mL，常规试剂盒的灵敏度通常在 0.8 ng/mL 至 46.9 ng/mL 之间。
样本处理要求：
1‌、血清‌：全血室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟取上清；可暂存于-20℃或-80℃，避免反复冻融
2‌、血浆‌：推荐使用EDTA或肝素抗凝管采集，采样后30分钟内于2–8℃、1000×g离心15分钟，取上清检测
3‌、组织匀浆‌：用预冷PBS冲洗组织去除残留血液，按1:9（重量:体积）比例加入含蛋白酶抑制剂的PBS进行研磨，超声或反复冻融辅助裂解后，5000×g离心5–10分钟取上清
检测流程简要：
‌一、试剂平衡‌：将试剂盒各组分于室温放置20分钟，恢复至常温。
‌二、加样‌：设空白孔、标准品孔（梯度浓度）、待测样本孔，每孔加入50μL样本或标准品。
‌三、孵育结合‌：每孔再加入HRP标记抗体100μL，37℃避光温育60分钟。
‌四、洗涤‌：弃液后用洗涤液洗板5次，拍干。
‌五、显色‌：每孔加TMB显色液A、B各50μL，37℃避光反应15分钟。
六、终止‌：每孔加50μL终止液，颜色由蓝转黄。
七、读数‌：15分钟内于450nm测定OD值，绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项：
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。样本在使用前也要在室温平衡60分钟。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。

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