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| 销售商： 上海联祖生物科技有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
检测原理
小鼠AST ELISA试剂盒主要分为双抗体夹心法（Sandwich ELISA）和竞争法（Competitive ELISA）两种，它们的显色原理与结果判定截然相反：
双抗体夹心法（Sandwich ELISA）
原理：用纯化的抗小鼠天门冬氨酸氨基转移酶（AST）捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体。往包被的微孔中依次加入小鼠AST抗原（样本或标准品）和HRP（辣根过氧化物酶）标记的检测抗体，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”免疫复合物。
结果判定：加入底物TMB显色后，颜色的深浅和样品中的AST含量呈正相关。
竞争法（Competitive ELISA）
原理：将AST抗原或抗体包被于微孔板上。实验时，样本或标准品中的AST与一定量的酶标记AST（AST-HRP标记物）竞争结合固相上的有限结合位点。
结果判定：样本中AST浓度越高，结合在板上的酶标物就越少。因此，颜色的深浅和样品中的AST含量呈反比（负相关）。
产品属性
主要产品性能
性能指标 参数参考范围/数值 说明
灵敏度 0.118 ng/mL 或 39 pg/mL 最低可检测剂量，不同试剂盒差异较大
检测范围 0.312 ~ 20 ng/mL 或 125 ~ 8000 pg/mL 需根据样本实际浓度选择合适的试剂盒
准确性 相关系数 R ≥ 0.99 标准品线性回归与预期浓度的相关性
重复性 板内/板间变异系数(CV) < 8% ~ 15% 反映实验结果的稳定性和重现性
特异性 无显著交叉反应 不与其它可溶性结构类似物发生交叉反应
双抗体夹心法（Sandwich ELISA）
原理：用纯化的抗小鼠天门冬氨酸氨基转移酶（AST）捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体。往包被的微孔中依次加入小鼠AST抗原（样本或标准品）和HRP（辣根过氧化物酶）标记的检测抗体，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”免疫复合物。
结果判定：加入底物TMB显色后，颜色的深浅和样品中的AST含量呈正相关。
竞争法（Competitive ELISA）
原理：将AST抗原或抗体包被于微孔板上。实验时，样本或标准品中的AST与一定量的酶标记AST（AST-HRP标记物）竞争结合固相上的有限结合位点。
结果判定：样本中AST浓度越高，结合在板上的酶标物就越少。因此，颜色的深浅和样品中的AST含量呈反比（负相关）。
产品属性
| 产品名称 | 小鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)试剂盒 | 货号 | LZ-E032061 |
| 英文名称 | Mouse Aspartate Aminotransferase,AST ELISA kit | 规格 | 48T/96T |
| 用途 | 仅供科研实验 | 品牌 | 联祖 |
灵敏度 0.118 ng/mL 或 39 pg/mL 最低可检测剂量，不同试剂盒差异较大
检测范围 0.312 ~ 20 ng/mL 或 125 ~ 8000 pg/mL 需根据样本实际浓度选择合适的试剂盒
准确性 相关系数 R ≥ 0.99 标准品线性回归与预期浓度的相关性
重复性 板内/板间变异系数(CV) < 8% ~ 15% 反映实验结果的稳定性和重现性
特异性 无显著交叉反应 不与其它可溶性结构类似物发生交叉反应
ELISA试剂盒实验
第一阶段：准备工作 (Pre-preparation)
试剂回温：从冰箱取出试剂盒，将所有试剂（包括浓缩洗涤液、标准品、样本等）在室温（20-25℃）下平衡至少 30分钟。
注意：如果浓缩洗涤液有结晶，需置于37℃水浴助溶并混匀。
标准品稀释：按照说明书要求，使用专用稀释液对标准品进行梯度稀释（通常做7-8个浓度点），现配现用。
样本处理：确保血清、血浆或细胞上清液澄清无沉淀（如有沉淀需再次离心）。
第二阶段：加样与孵育
加样：
在酶标板的对应孔中，分别加入 100 µL（具体体积看说明书）稀释好的标准品和待测样本。
设置空白孔（只加稀释液）。
建议：每个样本做2-3个复孔，数据更可靠。
孵育：
盖上封板膜，放入 37℃ 恒温箱孵育 1-2小时（或按说明书要求，如室温2小时）。
原理：让样本中的抗原与板上的捕获抗体结合。
第三阶段：洗板与检测抗体
洗板（关键步骤）：
弃去孔内液体，每孔加满洗涤液（约300-350 µL），静置浸泡 30-60秒 后甩干。
重复洗涤 3-5次。最后一次需在吸水纸上用力拍干，确保无残留液体。
加检测抗体：
每孔加入 100 µL 稀释好的检测抗体工作液（生物素化抗体）。
盖上封板膜，37℃ 孵育 1小时。
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ELISA试剂盒性能指标速查表
性能指标 关键参数 优质标准参考 意义
灵敏度 最低检测限 (LoD) 数值越低越好 能否测出微量样本
特异性 交叉反应率 < 5% (越低越好) 是否只测目标物，不误判
精密度 变异系数 (CV) 批内 < 10%, 批间 < 15% 结果是否稳定、可重复
准确性 回收率 80% - 120% 结果是否接近真实值
线性范围 标准曲线区间 覆盖样本预期浓度 能否准确定量高低浓度
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