小鼠FE ELISA试剂盒普遍采用双抗体夹心法(Sandwich ELISA)进行定量检测,具体反应原理如下:
包被与结合:试剂盒的酶标包被板上预先包被了特异性识别小鼠铁蛋白的捕获抗体。当加入标准品或待测样本时,样本中的铁蛋白会与固相载体上的抗体特异性结合。
形成复合物:洗涤除去未结合的成分后,加入酶标记的检测抗体(通常为HRP标记,或生物素标记抗体与亲和素-酶复合物)。它会与已经结合在板上的铁蛋白结合,形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物。
显色反应:再次彻底洗涤后,加入显色底物(通常为TMB)。在辣根过氧化物酶(HRP)的催化下,TMB转化为蓝色产物,加入终止液(酸性溶液)后变为黄色。
定量分析:颜色的深浅与样本中小鼠铁蛋白的浓度呈正相关。使用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过绘制标准曲线即可计算出样本中铁蛋白的实际浓度。
产品属性
| 产品名称 |
小鼠铁蛋白(FE)ELISA试剂盒 |
货号 |
LZ-E032060 |
| 英文名称 |
Mouse ferritin,FE ELISA Kit |
规格 |
48T/96T |
| 用途 |
仅供科研实验 |
品牌 |
联祖 |
主要产品性能
检测范围(线性范围):跨度非常大,常见的有 12.5 ng/mL 至 400 ng/mL,也有部分试剂盒的范围在 1.56 ng/mL 至 100 ng/mL,甚至部分试剂盒的检测范围可高达 37.5 ng/mL 至 2400 ng/mL。
灵敏度:能够检测到的最小浓度差异较大,一般在 0.28 ng/mL 至 9.4 ng/mL(即 280 pg/mL - 9400 pg/mL)左右,部分高灵敏度试剂盒可达到 < 0.3 ng/mL。
特异性:试剂盒使用的抗体经过优化,能特异性识别小鼠铁蛋白,与其他结构
ELISA试剂盒的局限性与缺点
1. 操作步骤繁琐,对操作要求高
流程长:典型的ELISA实验涉及加样、多次孵育、多次洗涤、显色、终止等步骤,耗时较长(通常需要3-5小时甚至过夜)。
洗涤关键:洗涤步骤至关重要,洗板不彻底会导致背景值过高(假阳性),洗板过度或干涸则影响灵敏度。这对操作人员的细心程度有一定要求。
2. 易受干扰与“钩状效应”
钩状效应 (Hook Effect):当样本中目标抗原浓度极高时,可能会饱和捕获抗体和检测抗体,导致信号反而下降,出现假阴性结果。这需要对高浓度样本进行稀释复测。
基质干扰:样本中的杂质(如溶血、脂血、类风湿因子等)可能会干扰抗原抗体结合,导致结果偏差。
交叉反应:虽然特异性较高,但如果抗体质量不佳,仍可能与结构相似的分子发生交叉反应。
3. 仅检测抗原含量,信息有限
ELISA只能告诉你“有多少”抗原,无法提供关于抗原的生物活性(是否具有功能)或结构完整性的信息。例如,变性的蛋白可能仍能被ELISA检测,但已失去生物活性。
4. 试剂成本与稳定性
试剂成本:高质量的抗体(尤其是配对良好的单抗)制备工艺复杂,导致试剂盒成本相对较高。
酶的不稳定性:酶标记物对温度和环境敏感,若保存不当容易失活,影响实验结果。
公司正在出售的产品
| 人RNA结合蛋白FUS(FUS/TLS)ELISA试剂盒 |
大鼠Tau蛋白PCR试剂盒 |
人吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)酶联免疫试剂盒 |
| 小鼠雌激素(E)ELISA试剂盒 |
大鼠骨形态形成蛋白拮抗蛋白酶联免疫试剂盒 |
大鼠toll样受体1(TLR1)ELISA试剂盒 |
| 人磷脂转运蛋白(PLTP)ELISA试剂盒 |
人不对称二甲基精氨酸(ADMA)酶联免疫试剂盒 |
人磷脂酰乙醇(PEth)PCR试剂盒 |
| 大鼠山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒 |
小鼠免疫球蛋白G4(IgG4)酶联免疫试剂盒 |
大鼠色氨酸羟化酶(TPH)PCR试剂盒 |
| 人谷氨酸受体(NMDAR)ELISA试剂盒 |
人肉碱酶联免疫试剂盒 |
人谷氨酸[NMDA]受体亚基ε-2(NR-2)PCR试剂盒 |
| 小鼠载脂蛋白H(Apo-H)ELISA试剂盒 |
大鼠载脂蛋白C-II(APOC2)ELISA |
小鼠载脂蛋白B48(apo-B48)PCR试剂盒 |
| 人细胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA试剂盒 |
人抗单链DNA抗体/变性DNA抗体(ssDNA)酶联免疫试剂盒 |
小鼠铁蛋白(FE)ELISA试剂盒 |
| 小鼠雌二醇(E2)PCR试剂盒 |
人淀粉样前体蛋白(APP)酶联免疫试剂盒 |
人Rho关联含卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock-2)PCR试剂盒 |
| Rat Tissue Polypeptide Antigen,TPA ELISA Kit |
Human Anti-Somatic Muscle Antibody,ASA ELISA Kit |
Human type Ⅱ collagen helical peptide,HELIX-ⅡELISA Kit |
| Human indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO ELISA Kit |
人不对称二甲基精氨酸(ADMA)酶联免疫试剂盒 |
人细胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)PCR试剂盒 |
注意事项
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。