小鼠同型半胱氨酸(Hcy)ELISA试剂盒
检测原理:
双抗体夹心法(主流方法):部分品牌下的OD值)与样本中Hcy的浓度呈正比。
竞争性抑制法:另一部分品牌采用此原理。酶标板微孔中预先包被了Hcy特异性抗体或Hcy抗原。样本中的游离Hcy与一定量的酶标记(或生物素标记)的Hcy抗原/抗体,共同竞争结合固相载体上有限的结合位点。样本中的Hcy浓度越高,结合到固相上的酶标记物就越少。显色后,颜色的深浅与样本中Hcy的浓度呈反比。
产品名称:
小鼠同型半胱氨酸(Hcy)ELISA试剂盒
英文名称:Mouse Homocysteic acid,Hcy ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E032058
用途:仅供科研研究实验
核心概览:
参数类别 性能指标/说明
灵敏度 跨度较大,通常在 39.55 ng/mL 左右,部分试剂盒可达更低水平。
检测范围 差异极大,常见线性范围如 0.75 - 15 μmol/L、0.8 - 20 μg/L 或 125 - 8000 ng/mL。
特异性 对小鼠Hcy具有高度特异性,与小鼠其他结构类似物无显著交叉反应。
重复性 板内变异系数(CV)通常 < 8% - 10%,板间变异系数 < 10% - 15%。
样本类型 适用于小鼠血清、血浆(EDTA/柠檬酸钠抗凝)、组织匀浆、细胞培养上清、
样本处理要求:
1、血清:全血室温静置2小时或4℃过夜,1000×g离心20分钟取上清;可暂存于-20℃或-80℃,避免反复冻融
2、血浆:推荐使用EDTA或肝素抗凝管采集,采样后30分钟内于2–8℃、1000×g离心15分钟,取上清检测
3、组织匀浆:用预冷PBS冲洗组织去除残留血液,按1:9(重量:体积)比例加入含蛋白酶抑制剂的PBS进行研磨,超声或反复冻融辅助裂解后,5000×g离心5–10分钟取上清
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。样本在使用前也要在室温平衡60分钟。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
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