小鼠戊型肝炎病毒(HEV)抗体试剂盒
检测原理:
市面上用于科研的小鼠HEV-IgG ELISA试剂盒主要采用间接法(Indirect ELISA),其核心反应流程如下:
包被与捕获:酶标板微孔中预先包被了基因重组或人工合成的戊型肝炎病毒特异性抗原。当加入待测样本时,如果样本中存在HEV-IgG抗体,它会与固相抗原特异性结合。
形成免疫复合物:洗涤去除未结合的血清成分后,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗小鼠IgG二抗(酶标抗体)。该酶标抗体与已结合的HEV-IgG抗体发生特异性结合,形成“固相抗原-HEV-IgG抗体-酶标二抗”的免疫复合物。
显色与测定:再次洗涤后加入TMB底物溶液,HRP催化TMB产生蓝色产物。加入终止液(通常为酸性溶液)后,溶液变为黄色。颜色的深浅(在450nm波长下测得的吸光度OD值)与样本中HEV-IgG抗体的含量呈正比。通过与临界值(Cut-off值)比较或绘制标准曲线,即可判断样本的阴阳性或计算出抗体的相对含量。
产品名称:
小鼠戊型肝炎病毒(HEV)抗体试剂盒
英文名称:Mouse Hepatitis E virus (HEV) antibody(IgG)ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E032030
用途:仅供科研研究实验
核心概览:
参数类别 性能指标/说明
灵敏度 最低检测浓度通常小于 0.1 ng/mL。
精密度(重复性) 板内变异系数(CV)通常 < 10% - 15%,板间变异系数 < 12% - 15%。
特异性 对小鼠HEV-IgG抗体具有高度特异性,与小鼠其他病原体抗体无显著交叉反应。
样本类型 适用于小鼠血清、血浆(EDTA/肝素/柠檬酸盐抗凝)及其他相关生物液体。
检测流程简要:
第一阶段:准备工作 (Pre-preparation)
试剂回温:从冰箱取出试剂盒,将所有试剂(包括浓缩洗涤液、标准品、样本等)在室温(20-25℃)下平衡至少 30分钟。
注意:如果浓缩洗涤液有结晶,需置于37℃水浴助溶并混匀。
标准品稀释:按照说明书a要求,使用专用稀释液对标准品进行梯度稀释(通常做7-8个浓度点),现配现用。
样本处理:确保血清、血浆或细胞上清液澄清无沉淀(如有沉淀需再次离心)。
第二阶段:加样与孵育
加样:
在酶标板的对应孔中,分别加入 100 µL(具体体积看说明书)稀释好的标准品和待测样本。
设置空白孔(只加稀释液)。
建议:每个样本做2-3个复孔,数据更可靠。
孵育:
盖上封板膜,放入 37℃ 恒温箱孵育 1-2小时(或按说明书要求,如室温2小时)。
原理:让样本中的抗原与板上的捕获抗体结合。
第三阶段:洗板与检测抗体
洗板(关键步骤):
弃去孔内液体,每孔加满洗涤液(约300-350 µL),静置浸泡 30-60秒 后甩干。
重复洗涤 3-5次。最后一次需在吸水纸上用力拍干,确保无残留液体。
加检测抗体:
每孔加入 100 µL 稀释好的检测抗体工作液(生物素化抗体)。
盖上封板膜,37℃ 孵育 1小时。
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注意事项:
标准曲线:每次实验都必须重新制作标准曲线,不可沿用旧数据。
洗涤步骤:洗涤不充分是导致误差的主要原因,需严格按照说明书洗板(通常3-5次)。
用途限制:此类试剂盒通常仅供科研使用,不可用于临床诊断
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