小鼠细胞角蛋白18-M65ELISA试剂盒
检测原理:
小鼠CK 18-M65 ELISA试剂盒主要采用双抗体夹心法(Sandwich ELISA)。
微孔板上预先包被了抗小鼠CK 18-M65的特异性捕获抗体。检测时,依次加入待测样本(或标准品)和生物素标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤后,样本中的CK 18-M65抗原会与包被抗体及检测抗体结合,形成“包被抗体-CK 18-M65抗原-生物素化检测抗体”的免疫复合物。随后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素(SABC),再次温育洗涤后,加入显色底物(通常为TMB)。
结果判定:在酶催化下产生蓝色,加入终止液后变为黄色。颜色的深浅与样本中CK 18-M65的浓度呈正相关。
产品名称:
小鼠细胞角蛋白18-M65ELISA试剂盒
英文名称:Mouse Cytokeratin 18-M65,CK 18-M65 ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E032023
用途:仅供科研研究实验
核心概览:
检测范围:跨度较大,选购时需根据预估的样本浓度选择。
常见质量浓度范围(ng级):0.156 - 10 ng/mL。
常见质量浓度范围(μg级):0.25 - 9 μg/L(即 0.25 - 9 ng/mL)。
灵敏度:不同试剂盒的最低检测限差异明显。
常规灵敏度:0.094 ng/mL(即 94 pg/mL)。
高灵敏度:可达 < 0.1 μg/L(即 < 0.1 ng/mL 或 < 100 pg/mL)。
特异性:具有高特异性,能够精准识别小鼠CK 18-M65(包括天然和重组型),与小鼠体内其他结构
适用样本类型:
该试剂盒适用于多种生物样本,主要包括:
血清
血浆(如EDTA、肝素抗凝)
细胞培养上清液
组织匀浆
细胞裂解液
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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