小鼠纤溶酶原激活物抑制因子1试剂盒
检测原理:
小鼠PAI-1 ELISA试剂盒主要采用双抗体一步夹心法(Sandwich ELISA)。
微孔板上预先包被了抗小鼠PAI-1的特异性捕获抗体。检测时,依次加入待测样本(或标准品)和辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤后,样本中的PAI-1抗原会与包被抗体及检测抗体结合,形成“包被抗体-PAI-1抗原-酶标抗体”的免疫复合物。
结果判定:加入显色底物(通常为TMB)后,在酶催化下产生蓝色,加入终止液后变为黄色。颜色的深浅与样本中PAI-1的浓度呈正相关。
产品名称:
小鼠纤溶酶原激活物抑制因子1试剂盒
英文名称:Mouse plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E032011
用途:仅供科研研究实验
核心概览:
检测范围:跨度极大,选购时需根据预估的样本浓度选择。
常见质量浓度范围(pg级):298 - 5000 pg/mL。
灵敏度:不同试剂盒的最低检测限差异明显。
常规灵敏度:0.31 ng/mL(即 310 pg/mL)、0.1 ng/mL。
特异性:具有高特异性,能够精准识别小鼠PAI-1(包括天然和重组型),与小鼠体内其他结构类似的丝氨酸蛋白酶抑制剂或可溶性类似物无显著交叉反应。
适用样本类型:
该试剂盒适用于多种生物样本,主要包括:
血清
血浆(如EDTA、肝素抗凝)
细胞培养上清液
组织匀浆
细胞裂解液
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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