小鼠腺苷高半胱氨酸酶(AHCY)试剂盒
检测原理:
小鼠AHCY ELISA试剂盒主要采用双抗体夹心法(Sandwich ELISA)。
微孔板上预先包被了抗小鼠AHCY的特异性捕获抗体。检测时,样本中的AHCY抗原会先与包被抗体结合,随后加入辣根过氧化物酶(HRP)或生物素标记的检测抗体,形成“包被抗体-AHCY抗原-酶标抗体”的免疫复合物。
结果判定:加入显色底物(通常为TMB)后,在酶催化下产生蓝色,加入终止液后变为黄色。颜色的深浅与样本中AHCY的浓度呈正相关。
| 产品名称 |
小鼠腺苷高半胱氨酸酶(AHCY)试剂盒 |
货号 |
LZ-E032007 |
| 英文名称 |
Mouse Adenosylhomocysteinase,AHCY ELISA kit |
规格 |
48T/96T |
| 用途 |
仅供科研实验 |
品牌 |
联祖 |
核心概览:
检测范围:跨度较大,选购时需根据预估的样本浓度选择。
常见质量浓度范围(ng级):0.156 - 10 ng/mL。
灵敏度:不同试剂盒的最低检测限差异明显。
常规灵敏度:0.088 ng/mL(即 88 pg/mL)。
高灵敏度:可达 0.060 ng/mL(即 60 pg/mL)甚至更低。
特异性:具有高特异性,能够精准识别小鼠AHCY(包括天然和重组型),与小鼠体内其他结构类似的酶或可溶性类似物无显著交叉反应。
样本处理要求:
1、血清:全血室温静置2小时或4℃过夜,1000×g离心20分钟取上清;可暂存于-20℃或-80℃,避免反复冻融
2、血浆:推荐使用EDTA或肝素抗凝管采集,采样后30分钟内于2–8℃、1000×g离心15分钟,取上清检测
3、组织匀浆:用预冷PBS冲洗组织去除残留血液,按1:9(重量:体积)比例加入含蛋白酶抑制剂的PBS进行研磨,超声或反复冻融辅助裂解后,5000×g离心5–10分钟取上清
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。样本在使用前也要在室温平衡60分钟。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
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