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检测原理
小鼠MUC5AC ELISA试剂盒主要采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。其具体反应过程如下：
包被与结合：酶标板上预先包被了能特异性识别小鼠MUC5AC的捕获抗体。将待测样本（如血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等）加入微孔中，样本中的MUC5AC会与包被抗体特异性结合。
形成夹心结构：洗去未结合的物质后，加入生物素标记的检测抗体，它会与已结合的MUC5AC再次结合。随后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素（或亲和素），形成“包被抗体 - MUC5AC - 生物素标记抗体 - HRP”的免疫复合物。
显色与检测：彻底洗涤后，加入底物TMB（四甲基联苯胺）进行显色。TMB在HRP的催化下转化为蓝色，加入终止液（通常为硫酸）后变为黄色。
结果判定：颜色的深浅与样本中小鼠MUC5AC的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度（OD值），通过与标准曲线对比，即可计算出样本中MUC5AC的浓度。
产品属性
主要产品性能
参数指标 常见参考范围 说明
检测范围 0.156 - 300 ng/mL 不同品牌跨度极大，需根据样本预估浓度选择
灵敏度 约 0.055 - 1.172 ng/mL 最低可检测出的MUC5AC浓度
特异性 极高 仅特异性识别小鼠天然或重组MUC5AC，无明显交叉反应
精密度 (CV) 板内 < 10%，板间 < 15% 变异系数越小，实验重复性和稳定性越好
样本类型 血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清、细胞裂解液等 样本需清澈透明，避免溶血和反复冻融
包被与结合：酶标板上预先包被了能特异性识别小鼠MUC5AC的捕获抗体。将待测样本（如血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等）加入微孔中，样本中的MUC5AC会与包被抗体特异性结合。
形成夹心结构：洗去未结合的物质后，加入生物素标记的检测抗体，它会与已结合的MUC5AC再次结合。随后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素（或亲和素），形成“包被抗体 - MUC5AC - 生物素标记抗体 - HRP”的免疫复合物。
显色与检测：彻底洗涤后，加入底物TMB（四甲基联苯胺）进行显色。TMB在HRP的催化下转化为蓝色，加入终止液（通常为硫酸）后变为黄色。
结果判定：颜色的深浅与样本中小鼠MUC5AC的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度（OD值），通过与标准曲线对比，即可计算出样本中MUC5AC的浓度。
产品属性
| 产品名称 | 小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC) 试剂盒 | 货号 | LZ-E031884 |
| 英文名称 | Mouse Mucin-5 subtype AC,MUC5AC ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
| 用途 | 仅供科研实验 | 品牌 | 联祖 |
检测范围 0.156 - 300 ng/mL 不同品牌跨度极大，需根据样本预估浓度选择
灵敏度 约 0.055 - 1.172 ng/mL 最低可检测出的MUC5AC浓度
特异性 极高 仅特异性识别小鼠天然或重组MUC5AC，无明显交叉反应
精密度 (CV) 板内 < 10%，板间 < 15% 变异系数越小，实验重复性和稳定性越好
样本类型 血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清、细胞裂解液等 样本需清澈透明，避免溶血和反复冻融
ELISA试剂盒实验
第一阶段：准备工作 (Pre-preparation)
试剂回温：从冰箱取出试剂盒，将所有试剂（包括浓缩洗涤液、标准品、样本等）在室温（20-25℃）下平衡至少 30分钟。
注意：如果浓缩洗涤液有结晶，需置于37℃水浴助溶并混匀。
标准品稀释：按照说明书要求，使用专用稀释液对标准品进行梯度稀释（通常做7-8个浓度点），现配现用。
样本处理：确保血清、血浆或细胞上清液澄清无沉淀（如有沉淀需再次离心）。
第二阶段：加样与孵育
加样：
在酶标板的对应孔中，分别加入 100 µL（具体体积看说明书）稀释好的标准品和待测样本。
设置空白孔（只加稀释液）。
建议：每个样本做2-3个复孔，数据更可靠。
孵育：
盖上封板膜，放入 37℃ 恒温箱孵育 1-2小时（或按说明书要求，如室温2小时）。
原理：让样本中的抗原与板上的捕获抗体结合。
第三阶段：洗板与检测抗体
洗板（关键步骤）：
弃去孔内液体，每孔加满洗涤液（约300-350 µL），静置浸泡 30-60秒 后甩干。
重复洗涤 3-5次。最后一次需在吸水纸上用力拍干，确保无残留液体。
加检测抗体：
每孔加入 100 µL 稀释好的检测抗体工作液（生物素化抗体）。
盖上封板膜，37℃ 孵育 1小时。
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ELISA试剂盒性能指标速查表
性能指标 关键参数 优质标准参考 意义
灵敏度 最低检测限 (LoD) 数值越低越好 能否测出微量样本
特异性 交叉反应率 < 5% (越低越好) 是否只测目标物，不误判
精密度 变异系数 (CV) 批内 < 10%, 批间 < 15% 结果是否稳定、可重复
准确性 回收率 80% - 120% 结果是否接近真实值
线性范围 标准曲线区间 覆盖样本预期浓度 能否准确定量高低浓度
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