小鼠TNFRSF11A/RANK ELISA试剂盒
检测原理:
小鼠TNFRSF11A ELISA试剂盒通常采用双抗体夹心法(Sandwich ELISA)进行定量检测。具体步骤如下:
包被与捕获:微孔板上预先包被有特异性的TNFRSF11A捕获抗体。当加入待测样本时,样本中的TNFRSF11A抗原会被抗体特异性地结合并固定在孔板上。
结合检测抗体:加入生物素标记的检测抗体,它会与已经被捕获的TNFRSF11A抗原结合,形成“捕获抗体-抗原-生物素标记检测抗体”的夹心复合物。
酶促显色:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素(或链霉亲和素),HRP与生物素紧密结合。洗涤去除未结合的物质后,加入TMB显色底物。HRP催化TMB底物产生蓝色产物。
终止与读数:加入酸性终止液使反应停止,溶液颜色由蓝色变为黄色。颜色的深浅与样本中TNFRSF11A的浓度成正比,使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线即可计算出样本中目标蛋白的浓度。
产品名称:
小鼠TNFRSF11A/RANK ELISA试剂盒
英文名称:Mouse Tumor necrosis factor receptor superfamily member 11A,TNFRSF11A ELISA kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E031861
用途:仅供科研研究实验
核心概览:
性能指标 典型参数范围 备注
检测范围 0.05 - 20 ng/mL 或 62.5 - 4000 pg/mL 具体取决于试剂盒的灵敏度设计
灵敏度 0.026 ng/mL 或 37.5 pg/mL 能够检测到的最低浓度
精密度 (CV) 批内差 < 8-10%;批间差 < 10-12% 反映实验的稳定性和重复性
适用样本 血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等 部分试剂盒也支持细胞裂解液
适用样本类型:
该试剂盒适用于多种生物样本,主要包括:
血清
血浆(如EDTA、肝素抗凝)
细胞培养上清液
组织匀浆
细胞裂解液
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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