人中心体蛋白1(CETN1)ELISA试剂盒
检测原理:
人CETN1 ELISA试剂盒普遍采用双抗体夹心法(酶联免疫吸附试验)。其核心反应过程如下:
包被与捕获:酶标板微孔中预先包被了能特异性结合CETN1的捕获抗体。
抗原结合:加入待测样本(或标准品)后,样本中的CETN1抗原会与包被抗体结合,形成“抗体-抗原”复合物。
检测抗体结合:加入生物素化的检测抗体,该抗体与已结合的CETN1抗原发生特异性结合。随后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素,形成“抗体-抗原-酶标复合物”。
显色与测定:经过充分洗涤去除未结合的物质后,加入TMB底物显色液。HRP催化无色的TMB转化为蓝色,再加入终止液(如硫酸溶液)后溶液变为黄色。
结果计算:颜色的深浅与样本中CETN1的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度(OD值),通过绘制标准曲线即可计算出样本中CETN1的实际浓度。
产品名称:
人中心体蛋白1(CETN1)ELISA试剂盒
英文名称:Human Centrin 1(CETN1)ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E031479
用途:仅供科研研究实验
核心概览:
性能指标 常见参数范围 说明
检测范围 0.156 ng/mL - 10 ng/mL(或 0.625 ng/mL - 40 ng/mL) 不同试剂盒跨度差异较大,需根据样本预估浓度选择
灵敏度 < 0.054 ng/mL(部分试剂盒约为 0.375 ng/mL) 指能检测出的最低CETN1浓度,数值越低越灵敏
特异性 优异 与人CETN1特异性结合,不与其他结构类似物发生显著交叉反应
精密度(板内) 变异系数 CV < 10% 同一块板上重复检测的误差范围,反映操作的稳定性
适用样本类型:
该试剂盒适用于多种生物样本,主要包括:
血清
血浆(如EDTA、肝素抗凝)
细胞培养上清液
组织匀浆
细胞裂解液
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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