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| 销售商： 上海联祖生物科技有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
检测原理
人ESD ELISA试剂盒主要采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA），其核心反应过程如下：
包被与结合：将特异性的酯酶D（ESD）捕获抗体预先包被在96孔微孔板上。向微孔中分别加入标准品或待测样本，样本中的ESD会与固相载体上的抗体发生特异性结合。
形成夹心：洗涤去除未结合的物质后，加入生物素化的ESD检测抗体，使其与已结合的ESD再次结合，形成“捕获抗体-抗原-生物素化检测抗体”的免疫复合物。
酶联与显色：再次洗涤后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素（或链霉亲和素）。随后加入TMB底物进行显色，TMB在HRP的催化下产生蓝色产物，在酸性终止液的作用下最终转化为黄色。
结果计算：颜色的深浅与样本中酯酶D（ESD）的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），通过绘制的标准曲线即可计算出样本中ESD的准确浓度。
产品属性
主要产品性能
其他核心性能指标：
特异性：与天然的人ESD具有高特异性，与结构类似物之间未观察到显著的交叉反应或干扰。
精密度（重复性）：
批内差（板内变异系数 CV）：通常 < 15%
批间差（板间变异系数 CV）：通常 < 15%
适用物种：人（Homo sapiens）。
包被与结合：将特异性的酯酶D（ESD）捕获抗体预先包被在96孔微孔板上。向微孔中分别加入标准品或待测样本，样本中的ESD会与固相载体上的抗体发生特异性结合。
形成夹心：洗涤去除未结合的物质后，加入生物素化的ESD检测抗体，使其与已结合的ESD再次结合，形成“捕获抗体-抗原-生物素化检测抗体”的免疫复合物。
酶联与显色：再次洗涤后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素（或链霉亲和素）。随后加入TMB底物进行显色，TMB在HRP的催化下产生蓝色产物，在酸性终止液的作用下最终转化为黄色。
结果计算：颜色的深浅与样本中酯酶D（ESD）的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（O.D.值），通过绘制的标准曲线即可计算出样本中ESD的准确浓度。
产品属性
| 产品名称 | 人酯酶D(ESD)ELISA试剂盒 | 货号 | LZ-E031464 |
| 英文名称 | Human Esterase D(ESD)ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
| 用途 | 仅供科研实验 | 品牌 | 联祖 |
特异性：与天然的人ESD具有高特异性，与结构类似物之间未观察到显著的交叉反应或干扰。
精密度（重复性）：
批内差（板内变异系数 CV）：通常 < 15%
批间差（板间变异系数 CV）：通常 < 15%
适用物种：人（Homo sapiens）。
ELISA试剂盒实验
第一阶段：准备工作 (Pre-preparation)
试剂回温：从冰箱取出试剂盒，将所有试剂（包括浓缩洗涤液、标准品、样本等）在室温（20-25℃）下平衡至少 30分钟。
注意：如果浓缩洗涤液有结晶，需置于37℃水浴助溶并混匀。
标准品稀释：按照说明书要求，使用专用稀释液对标准品进行梯度稀释（通常做7-8个浓度点），现配现用。
样本处理：确保血清、血浆或细胞上清液澄清无沉淀（如有沉淀需再次离心）。
第二阶段：加样与孵育
加样：
在酶标板的对应孔中，分别加入 100 µL（具体体积看说明书）稀释好的标准品和待测样本。
设置空白孔（只加稀释液）。
建议：每个样本做2-3个复孔，数据更可靠。
孵育：
盖上封板膜，放入 37℃ 恒温箱孵育 1-2小时（或按说明书要求，如室温2小时）。
原理：让样本中的抗原与板上的捕获抗体结合。
第三阶段：洗板与检测抗体
洗板（关键步骤）：
弃去孔内液体，每孔加满洗涤液（约300-350 µL），静置浸泡 30-60秒 后甩干。
重复洗涤 3-5次。最后一次需在吸水纸上用力拍干，确保无残留液体。
加检测抗体：
每孔加入 100 µL 稀释好的检测抗体工作液（生物素化抗体）。
盖上封板膜，37℃ 孵育 1小时。
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ELISA试剂盒性能指标速查表
性能指标 关键参数 优质标准参考 意义
灵敏度 最低检测限 (LoD) 数值越低越好 能否测出微量样本
特异性 交叉反应率 < 5% (越低越好) 是否只测目标物，不误判
精密度 变异系数 (CV) 批内 < 10%, 批间 < 15% 结果是否稳定、可重复
准确性 回收率 80% - 120% 结果是否接近真实值
线性范围 标准曲线区间 覆盖样本预期浓度 能否准确定量高低浓度
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