人再生胰岛衍生蛋白1β(REG1β)试剂盒
检测原理:
包被:将特异性的人REG1β捕获抗体预先包被在酶标板的微孔上,形成固相载体。
结合:向微孔中加入标准品或待测样本(如血清、血浆等),样本中的REG1β抗原会与固相载体上的捕获抗体特异性结合。
检测:洗去未结合的物质后,加入生物素标记的REG1β检测抗体,该抗体与已结合的REG1β抗原形成“抗体-抗原-抗体”的夹心复合物。
酶联:再次洗涤后,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素。链霉亲和素与生物素标记的检测抗体高亲和力结合。
显色:加入TMB底物溶液,HRP催化TMB显色,溶液变为蓝色。颜色的深浅与样本中REG1β的浓度呈正相关。
终止与读数:加入终止液(通常为硫酸)终止反应,溶液由蓝色变为黄色。使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度(OD值),通过标准曲线计算样本中REG1β的浓度。
产品名称:
人再生胰岛衍生蛋白1β(REG1β)试剂盒
英文名称:Human Regenerating Islet Derived Protein 1 Beta(REG1b)ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E031354
用途:仅供科研研究实验
核心概览:
不同品牌或型号的试剂盒性能参数存在差异,以下是常见参数的范围:
灵敏度:不同试剂盒的检测下限差异较大,范围可从 20 pg/mL 到 0.188 ng/mL 不等。
检测范围:常见的检测范围包括 0.156 - 10 ng/mL 和 0.313 - 20 ng/mL 等。
特异性:试剂盒对REG1β具有高特异性,通常不与其它结构类似物发生交叉反应。
适用样本类型:
该试剂盒适用于多种生物样本,主要包括:
血清
血浆(如EDTA、肝素抗凝)
细胞培养上清液
组织匀浆
细胞裂解液
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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