人原肌球蛋白2β(TPM2)ELISA试剂盒
检测原理:
包被与捕获:试剂盒的酶标板上预先包被了特异性的抗人TPM2抗体(捕获抗体)。
抗原结合:当加入样本(如组织匀浆、生物液体等)时,样本中的TPM2会与板上的捕获抗体特异性结合。
检测抗体结合:洗涤去除未结合物质后,加入生物素标记的抗人TPM2检测抗体。它会与已捕获的TPM2结合,形成“捕获抗体-抗原-生物素化检测抗体”复合物。
酶结合与显色:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素(Avidin)进行孵育,HRP与生物素结合。再次洗涤后,加入TMB显色底物。HRP催化TMB显色,反应呈现蓝色,加入终止液后变为黄色。
结果计算:颜色的深浅与样本中TPM2的浓度成正比。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过绘制标准曲线即可计算出样本浓度。
产品名称:
人原肌球蛋白2β(TPM2)ELISA试剂盒
英文名称:Human Tropomyosin 2 Beta(TPM2)ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E031317
用途:仅供科研研究实验
核心概览:
不同品牌和型号的试剂盒性能参数会有所差异,以下是综合主流产品信息整理的关键参数:
通常在 < 0.25 ng/mL 左右。部分高灵敏度试剂盒可检测低至 0.247 ng/mL 的浓度。
检测范围 (Assay Range)
常见的检测范围包括:
常规范围:0.625 - 40 ng/mL。
特异性 (Specificity)
具有良好的特异性,能够识别样本中的人源TPM2。
检测流程简要:
第一阶段:准备工作 (Pre-preparation)
试剂回温:从冰箱取出试剂盒,将所有试剂(包括浓缩洗涤液、标准品、样本等)在室温(20-25℃)下平衡至少 30分钟。
注意:如果浓缩洗涤液有结晶,需置于37℃水浴助溶并混匀。
标准品稀释:按照说明书a要求,使用专用稀释液对标准品进行梯度稀释(通常做7-8个浓度点),现配现用。
样本处理:确保血清、血浆或细胞上清液澄清无沉淀(如有沉淀需再次离心)。
第二阶段:加样与孵育
加样:
在酶标板的对应孔中,分别加入 100 µL(具体体积看说明书)稀释好的标准品和待测样本。
设置空白孔(只加稀释液)。
建议:每个样本做2-3个复孔,数据更可靠。
孵育:
盖上封板膜,放入 37℃ 恒温箱孵育 1-2小时(或按说明书要求,如室温2小时)。
原理:让样本中的抗原与板上的捕获抗体结合。
第三阶段:洗板与检测抗体
洗板(关键步骤):
弃去孔内液体,每孔加满洗涤液(约300-350 µL),静置浸泡 30-60秒 后甩干。
重复洗涤 3-5次。最后一次需在吸水纸上用力拍干,确保无残留液体。
加检测抗体:
每孔加入 100 µL 稀释好的检测抗体工作液(生物素化抗体)。
盖上封板膜,37℃ 孵育 1小时。
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注意事项:
标准曲线:每次实验都必须重新制作标准曲线,不可沿用旧数据。
洗涤步骤:洗涤不充分是导致误差的主要原因,需严格按照说明书洗板(通常3-5次)。
用途限制:此类试剂盒通常仅供科研使用,不可用于临床诊断
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