人生长调节致癌基因α(GROα)ELISA试剂盒
检测原理:
包被与捕获:试剂盒的酶标板上预先包被了特异性的抗人GROα单克隆抗体或多克隆抗体(捕获抗体)。
抗原结合:当加入样本(如血清、血浆等)时,样本中的GROα会与板上的捕获抗体特异性结合。
检测抗体结合:洗涤去除未结合物质后,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗人GROα检测抗体(部分试剂盒采用生物素标记检测抗体+亲和素-HRP的形式)。它会与已捕获的GROα结合,形成“捕获抗体-抗原-酶标检测抗体”的免疫复合物。
显色与检测:再次洗涤后,加入TMB显色底物。HRP会催化TMB显色,反应呈现蓝色,加入终止液后变为黄色。颜色的深浅与样本中GROα的浓度成正比。
结果计算:用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过绘制标准曲线即可计算出样本中GROα的浓度。
产品名称:
人生长调节致癌基因α(GROα)ELISA试剂盒
英文名称:GROα/MGSA ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E031281
用途:仅供科研研究实验
核心概览:
不同品牌和型号的试剂盒性能参数会有所差异,以下是综合多个主流产品信息整理的关键参数:
通常在 1.5 - 15.6 pg/mL 之间。部分高灵敏度试剂盒可达 7.8 pg/mL 级别。
检测范围 (Assay Range)
常见的检测范围包括:
常规范围:15.6 - 1000 pg/mL。
特定范围:0.125 - 1 ng/mL (即 125 - 1000 pg/mL)。
适用样本类型:
该试剂盒适用于多种生物样本,主要包括:
血清
血浆(如EDTA、肝素抗凝)
细胞培养上清液
组织匀浆
细胞裂解液
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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