人CXC趋化因子配体1(CXCL1)ELISA试剂盒
检测原理:
人CXCL1 ELISA试剂盒普遍采用双抗体一步夹心法(Sandwich ELISA)。其基本流程如下:
包被:将特异性的抗人CXCL1捕获抗体预先包被在酶标板的微孔中。
加样与结合:向微孔中加入待测样本(如血清、血浆、细胞上清)和标准品。样本中的CXCL1抗原会与固相捕获抗体特异性结合。
酶标抗体结合:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体(或生物素标记的检测抗体,随后加入酶标链霉亲和素)。该抗体与已结合的CXCL1形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物。
洗涤:彻底洗涤微孔,去除未结合的游离成分。
显色:加入显色底物(TMB)。在HRP的催化下,TMB转化为蓝色,颜色的深浅与样本中CXCL1的浓度呈正相关。
终止与检测:加入终止液(酸性溶液),反应终止,颜色由蓝变黄。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),根据标准曲线计算样本浓度。
产品名称:
人CXC趋化因子配体1(CXCL1)ELISA试剂盒
英文名称:Human chemokine (C-X-C motif) ligand 1 (melanoma growth stimulating activity, alpha) (CXCL1) ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E031227
用途:仅供科研研究实验
核心概览:
性能参数 典型参数范围/说明
检测方法 双抗体夹心法 (Sandwich ELISA)
检测范围 需参考具体试剂盒说明书(常见范围如 15.6 - 1000 pg/mL)
灵敏度 高灵敏度(具体数值视品牌而定,通常 < 10 pg/mL)
特异性 与人CXCL1特异性结合,与其他趋化因子无明显交叉反应
适用样本类型:
该试剂盒适用于多种生物样本,主要包括:
血清
血浆(如EDTA、肝素抗凝)
细胞培养上清液
组织匀浆
细胞裂解液
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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