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| 销售商： 上海联祖生物科技有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
检测原理
捕获：试剂盒的微孔板预先包被了针对人BAFF的特异性捕获抗体。
结合：向微孔中加入待测样本（如血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清）或标准品。样本中的BAFF抗原会与包被在板上的捕获抗体特异性结合。
检测：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体（或生物素标记的检测抗体，随后加入HRP标记的亲和素/链霉亲和素）。检测抗体与BAFF抗原的另一位点结合，形成“捕获抗体-抗原-酶标抗体”的夹心复合物。
洗涤：经过温育后，彻底洗涤微孔，去除未结合的物质。
显色：加入底物TMB（3,3',5,5'-四甲基联苯胺）进行显色。在HRP的催化下，TMB由无色变为蓝色。
终止与测定：加入终止液（通常为硫酸）后，蓝色会转变为黄色。颜色的深浅与样本中BAFF的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线即可计算出样品中BAFF的浓度。
产品属性
主要产品性能
参数指标 典型数值/范围 说明
检测范围 0.08 - 5 ng/mL 也有试剂盒覆盖 0.312 - 20 ng/mL 或 0.156 - 10 ng/mL，具体视品牌而定。
灵敏度 12.7 pg/mL 也有试剂盒灵敏度为 0.078 ng/mL 或 < 30 pg/mL。
精密度 (CV%) 批内 < 8-10%，批间 < 10-15% 反映实验的重复性，CV值越小，重复性越好。
结合：向微孔中加入待测样本（如血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清）或标准品。样本中的BAFF抗原会与包被在板上的捕获抗体特异性结合。
检测：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体（或生物素标记的检测抗体，随后加入HRP标记的亲和素/链霉亲和素）。检测抗体与BAFF抗原的另一位点结合，形成“捕获抗体-抗原-酶标抗体”的夹心复合物。
洗涤：经过温育后，彻底洗涤微孔，去除未结合的物质。
显色：加入底物TMB（3,3',5,5'-四甲基联苯胺）进行显色。在HRP的催化下，TMB由无色变为蓝色。
终止与测定：加入终止液（通常为硫酸）后，蓝色会转变为黄色。颜色的深浅与样本中BAFF的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线即可计算出样品中BAFF的浓度。
产品属性
| 产品名称 | 人B细胞活化因子(BAFF/CD257B)ELISA试剂盒 | 货号 | LZ-E031224 |
| 英文名称 | Human BAFF/CD257/TNFSF13B（B-Cell Activating Factor）ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
| 用途 | 仅供科研实验 | 品牌 | 联祖 |
检测范围 0.08 - 5 ng/mL 也有试剂盒覆盖 0.312 - 20 ng/mL 或 0.156 - 10 ng/mL，具体视品牌而定。
灵敏度 12.7 pg/mL 也有试剂盒灵敏度为 0.078 ng/mL 或 < 30 pg/mL。
精密度 (CV%) 批内 < 8-10%，批间 < 10-15% 反映实验的重复性，CV值越小，重复性越好。
ELISA试剂盒实验
第一阶段：准备工作 (Pre-preparation)
试剂回温：从冰箱取出试剂盒，将所有试剂（包括浓缩洗涤液、标准品、样本等）在室温（20-25℃）下平衡至少 30分钟。
注意：如果浓缩洗涤液有结晶，需置于37℃水浴助溶并混匀。
标准品稀释：按照说明书要求，使用专用稀释液对标准品进行梯度稀释（通常做7-8个浓度点），现配现用。
样本处理：确保血清、血浆或细胞上清液澄清无沉淀（如有沉淀需再次离心）。
第二阶段：加样与孵育
加样：
在酶标板的对应孔中，分别加入 100 µL（具体体积看说明书）稀释好的标准品和待测样本。
设置空白孔（只加稀释液）。
建议：每个样本做2-3个复孔，数据更可靠。
孵育：
盖上封板膜，放入 37℃ 恒温箱孵育 1-2小时（或按说明书要求，如室温2小时）。
原理：让样本中的抗原与板上的捕获抗体结合。
第三阶段：洗板与检测抗体
洗板（关键步骤）：
弃去孔内液体，每孔加满洗涤液（约300-350 µL），静置浸泡 30-60秒 后甩干。
重复洗涤 3-5次。最后一次需在吸水纸上用力拍干，确保无残留液体。
加检测抗体：
每孔加入 100 µL 稀释好的检测抗体工作液（生物素化抗体）。
盖上封板膜，37℃ 孵育 1小时。
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ELISA试剂盒性能指标速查表
性能指标 关键参数 优质标准参考 意义
灵敏度 最低检测限 (LoD) 数值越低越好 能否测出微量样本
特异性 交叉反应率 < 5% (越低越好) 是否只测目标物，不误判
精密度 变异系数 (CV) 批内 < 10%, 批间 < 15% 结果是否稳定、可重复
准确性 回收率 80% - 120% 结果是否接近真实值
线性范围 标准曲线区间 覆盖样本预期浓度 能否准确定量高低浓度
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