人11去氢血栓烷B2(11-DH-TXB2)试剂盒
检测原理:
该试剂盒的检测原理基于抗原-抗体的特异性反应,具体步骤如下:
包被与捕获:微孔板已预先包被了能特异性结合人11-DH-TXB2的捕获抗体。
抗原结合:向微孔中加入待测样本(如血清、血浆、尿液等)和标准品。样本中的11-DH-TXB2抗原会与板上的捕获抗体结合。
检测抗体结合:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体,它会与已结合的11-DH-TXB2抗原的另一位点结合,形成“捕获抗体-抗原-酶标抗体”的三明治复合物。
洗涤与显色:彻底洗涤以去除未结合的物质。随后加入底物TMB,在HRP的催化下,TMB转化为蓝色产物。
终止与检测:加入终止液使反应停止,溶液颜色由蓝色变为黄色。颜色的深浅与样本中11-DH-TXB2的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线即可计算出样本中11-DH-TXB2的浓度。
产品名称:
人11去氢血栓烷B2(11-DH-TXB2)试剂盒
英文名称:Human 11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E031153
用途:仅供科研研究实验
核心概览:
不同品牌试剂盒的性能参数可能存在差异,以下是基于现有资料整理的参数示例:
性能参数 品牌A示例
检测类型 双抗体夹心法
检测范围 125 - 4000 pg/mL
灵敏度 10 pg/mL
精密度 板内、板间变异系数均 < 10%
适用样本类型:
该试剂盒适用于多种生物样本,主要包括:
血清
血浆(如EDTA、肝素抗凝)
细胞培养上清液
组织匀浆
细胞裂解液
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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