人A组链球菌菌壁多糖抗体(ASP)试剂盒
检测原理:
人A组链球菌菌壁多糖抗体(ASP)ELISA试剂盒普遍采用间接法(Indirect ELISA)。这是一种常用于检测样本中特异性抗体的方法,其基本流程如下:
包被:将A组链球菌的菌壁多糖抗原预先包被在酶标板的微孔中,形成固相抗原。
加样与结合:向微孔中加入稀释后的待测样本(如血清、血浆)。如果样本中含有针对A组链球菌的特异性抗体(ASP),它会与固相抗原特异性结合。
酶标二抗结合:加入酶(通常是辣根过氧化物酶HRP)标记的抗人抗体(即二抗)。该二抗会与已结合在固相抗原上的特异性抗体结合,形成“固相抗原-待测抗体-酶标二抗”复合物。
洗涤:洗去未结合的游离成分。
显色:加入显色底物(如TMB)。在酶的催化下,底物发生颜色反应(通常为蓝色),颜色的深浅与样本中特异性抗体的浓度成正比。
终止与检测:加入终止液(如硫酸)终止反应,颜色变为黄色。使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度(OD值)。
计算:根据样本的OD值与临界值(Cut-off)比较,或通过标准曲线计算出ASP抗体的浓度。
产品名称:
人A组链球菌菌壁多糖抗体(ASP)试剂盒
英文名称:Human antibody to group A streptococcal polysaccharide,ASP ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E031122
用途:仅供科研研究实验
核心概览:
性能参数 典型参数范围
灵敏度 通常小于 1.0 U/mL(具体数值请以实际说明书为准)
精密度 板内变异系数(CV) < 10%
板间变异系数(CV) < 15%
特异性 不与其它无关细菌抗原或抗体发生交叉反应
样本类型 血清、血浆、组织匀浆等
适用样本类型:
该试剂盒适用于多种生物样本,主要包括:
血清
血浆(如EDTA、肝素抗凝)
细胞培养上清液
组织匀浆
细胞裂解液
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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