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人B7-H4ELISA试剂盒
检测原理：该试剂盒的检测原理基于抗原-抗体的特异性反应，具体步骤如下：
包被与捕获：微孔板已预先包被了能特异性结合人B7-H4的捕获抗体。
抗原结合：向微孔中加入待测样本（如血清、血浆等）和标准品。样本中的B7-H4抗原会与板上的捕获抗体结合。
检测抗体结合：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，它会与已结合的B7-H4抗原的另一位点结合，形成“捕获抗体-抗原-酶标抗体”的三明治复合物。
洗涤与显色：彻底洗涤以去除未结合的物质。随后加入底物TMB，在HRP的催化下，TMB转化为蓝色产物。
终止与检测：加入终止液使反应停止，溶液颜色由蓝色变为黄色。颜色的深浅与样本中B7-H4的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线即可计算出样本中B7-H4的浓度。
产品名称：人B7-H4ELISA试剂盒
英文名称：Human B7-H4 ELISA Kit
规格：48T/96T
货号：LZ-E031121
用途：仅供科研研究实验
核心概览：
不同品牌试剂盒的性能参数可能存在差异，以下是基于现有资料整理的参数示例：
性能参数 品牌A示例 品牌B示例
检测类型 双抗体夹心法 夹心法 (Sandwich)
检测范围 7.8-500 ng/mL 23-1500 pg/mL
灵敏度 < 1.95 ng/mL 30 pg/mL
精密度 板内变异系数 < 8%
板间变异系数 < 10% 板内、板间变异系数均 < 10%
检测流程简要：
第一阶段：准备工作 (Pre-preparation)
试剂回温：从冰箱取出试剂盒，将所有试剂（包括浓缩洗涤液、标准品、样本等）在室温（20-25℃）下平衡至少 30分钟。
注意：如果浓缩洗涤液有结晶，需置于37℃水浴助溶并混匀。
标准品稀释：按照说明书a要求，使用专用稀释液对标准品进行梯度稀释（通常做7-8个浓度点），现配现用。
样本处理：确保血清、血浆或细胞上清液澄清无沉淀（如有沉淀需再次离心）。
第二阶段：加样与孵育
加样：
在酶标板的对应孔中，分别加入 100 µL（具体体积看说明书）稀释好的标准品和待测样本。
设置空白孔（只加稀释液）。
建议：每个样本做2-3个复孔，数据更可靠。
孵育：
盖上封板膜，放入 37℃ 恒温箱孵育 1-2小时（或按说明书要求，如室温2小时）。
原理：让样本中的抗原与板上的捕获抗体结合。
第三阶段：洗板与检测抗体
洗板（关键步骤）：
弃去孔内液体，每孔加满洗涤液（约300-350 µL），静置浸泡 30-60秒 后甩干。
重复洗涤 3-5次。最后一次需在吸水纸上用力拍干，确保无残留液体。
加检测抗体：
每孔加入 100 µL 稀释好的检测抗体工作液（生物素化抗体）。
盖上封板膜，37℃ 孵育 1小时。
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标准曲线：每次实验都必须重新制作标准曲线，不可沿用旧数据。
洗涤步骤：洗涤不充分是导致误差的主要原因，需严格按照说明书洗板（通常3-5次）。
用途限制：此类试剂盒通常仅供科研使用，不可用于临床诊断
手机版：人B7-H4ELISA试剂盒
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