人blca-4ELISA试剂盒
检测原理:
该试剂盒的检测过程基于抗原-抗体的特异性反应,具体步骤如下:
包被与捕获:微孔板已预先包被有能特异性识别BLCA-4的抗体。当加入样本(如血清、血浆、尿液等)后,样本中的BLCA-4抗原会与这些固定化的抗体结合。
检测抗体结合:洗去未结合的物质后,加入生物素标记的BLCA-4特异性检测抗体,该抗体同样会与BLCA-4抗原结合,形成“抗体-抗原-抗体”的夹心复合物。
酶标结合与显色:再次洗涤后,加入与辣根过氧化物酶(HRP)结合的亲和素(Avidin)。最后,加入底物溶液(如TMB),在HRP的催化下产生颜色反应。
定量分析:颜色的深浅与样本中BLCA-4的浓度成正比。通过酶标仪测定吸光度(OD值),并与标准品曲线对比,即可计算出样本中BLCA-4的精确浓度。
产品名称:
人blca-4ELISA试剂盒
英文名称:Human blca-4 ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E031116
用途:仅供科研研究实验
核心概览:
参数类别 具体指标
样本类型 血清、血浆、组织匀浆、尿液
检测范围 0.625 ng/ml - 40 ng/ml
灵敏度 < 0.156 ng/ml
精密度 板内变异系数(CV) < 8%;板间变异系数(CV) < 10%
特异性 对人BLCA-4具有高敏感性和特异性,未观察到与其类似物有显著交叉反应
适用样本类型:
该试剂盒适用于多种生物样本,主要包括:
血清
血浆(如EDTA、肝素抗凝)
细胞培养上清液
组织匀浆
细胞裂解液
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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