人CC趋化因子受体1(CCR1)ELISA试剂盒
检测原理:
该试剂盒主要采用双抗体夹心法(Sandwich ELISA)作为检测原理。其基本步骤如下:
包被与捕获:试剂盒的微孔板表面已预包被了针对人CCR1的特异性捕获抗体。当加入样本或标准品后,样本中的CCR1抗原会与板上的捕获抗体结合。
检测抗体结合:洗去未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体。该抗体能与CCR1抗原的另一位点结合,从而形成“捕获抗体-CCR1抗原-酶标检测抗体”的夹心复合物。
显色反应:再次洗涤后,加入TMB底物溶液。HRP会催化TMB显色,溶液变为蓝色。
终止与检测:加入终止液(通常为酸性溶液)终止反应,溶液颜色由蓝色变为黄色。使用酶标仪在450nm波长下检测吸光度(OD值)。样本中CCR1的浓度与OD值成正比,通过与标准品绘制的标准曲线进行对比,即可计算出样本中CCR1的精确浓度。
产品名称:
人CC趋化因子受体1(CCR1)ELISA试剂盒
英文名称:Human CC-chemokine receptor 1,CCR1 ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E031092
用途:仅供科研研究实验
核心概览:
不同厂家生产的试剂盒在具体参数上存在差异,以下是常见的性能参数范围:
参数 典型范围/数值
检测范围 6.25 - 400 pg/mL 或 0.31 - 20 ng/mL
灵敏度 通常为 3 pg/mL 或 0.19 ng/mL (190 pg/mL)
精密度 批内变异系数(CV) < 10%
批间变异系数(CV) < 15%
样本类型 血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆等
适用样本类型:
该试剂盒适用于多种生物样本,主要包括:
血清
血浆(如EDTA、肝素抗凝)
细胞培养上清液
组织匀浆
细胞裂解液
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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