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| 销售商： 上海联祖生物科技有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
检测原理
人CCR7 ELISA试剂盒通常采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）。这是目前检测蛋白抗原最常用且特异性较高的方法。
具体步骤如下：
包被与捕获：酶标板（固相载体）上预先包被了针对人CCR7的特异性捕获抗体（通常为鼠抗人CCR7单克隆抗体）。
抗原结合：加入样本（血清、血浆、细胞裂解液、组织匀浆或细胞培养上清等）或标准品，样本中的CCR7抗原会与固相上的捕获抗体特异性结合。
检测抗体结合：洗去未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体（或生物素标记抗体+酶标亲和素）。该抗体识别CCR7分子上的另一个抗原表位，从而形成“固相抗体-CCR7-酶标抗体”的夹心复合物。
显色反应：加入底物溶液（通常为TMB）。TMB在HRP的催化下由无色变为蓝色。
终止与读数：加入终止液（如硫酸），反应终止，溶液颜色由蓝色变为黄色。颜色的深浅与样本中CCR7的浓度呈正相关。使用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本浓度。
产品属性
主要产品性能
参数项目 典型数值/描述 说明
检测范围 0.156 – 10 ng/mL
(或 15.6 – 1000 pg/mL) 覆盖生理及病理状态下的常见浓度范围。
灵敏度 < 0.1 ng/mL
(典型值约 0.058 ng/mL 或 < 50 pg/mL) 高灵敏度，能够检测到低水平的趋化因子受体表达。
特异性 高特异性 专一识别人CCR7，与其他趋化因子受体（如CCR5, CXCR4）无明显交叉反应。
精密度 (CV) 批内 < 10%
批间 < 12% 变异系数越低，说明实验重复性越好
具体步骤如下：
包被与捕获：酶标板（固相载体）上预先包被了针对人CCR7的特异性捕获抗体（通常为鼠抗人CCR7单克隆抗体）。
抗原结合：加入样本（血清、血浆、细胞裂解液、组织匀浆或细胞培养上清等）或标准品，样本中的CCR7抗原会与固相上的捕获抗体特异性结合。
检测抗体结合：洗去未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体（或生物素标记抗体+酶标亲和素）。该抗体识别CCR7分子上的另一个抗原表位，从而形成“固相抗体-CCR7-酶标抗体”的夹心复合物。
显色反应：加入底物溶液（通常为TMB）。TMB在HRP的催化下由无色变为蓝色。
终止与读数：加入终止液（如硫酸），反应终止，溶液颜色由蓝色变为黄色。颜色的深浅与样本中CCR7的浓度呈正相关。使用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本浓度。
产品属性
| 产品名称 | 人CC趋化因子受体7(CCR7)ELISA试剂盒 | 货号 | LZ-E031089 |
| 英文名称 | Human CCR7 ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
| 用途 | 仅供科研实验 | 品牌 | 联祖 |
检测范围 0.156 – 10 ng/mL
(或 15.6 – 1000 pg/mL) 覆盖生理及病理状态下的常见浓度范围。
灵敏度 < 0.1 ng/mL
(典型值约 0.058 ng/mL 或 < 50 pg/mL) 高灵敏度，能够检测到低水平的趋化因子受体表达。
特异性 高特异性 专一识别人CCR7，与其他趋化因子受体（如CCR5, CXCR4）无明显交叉反应。
精密度 (CV) 批内 < 10%
批间 < 12% 变异系数越低，说明实验重复性越好
ELISA试剂盒实验
第一阶段：准备工作 (Pre-preparation)
试剂回温：从冰箱取出试剂盒，将所有试剂（包括浓缩洗涤液、标准品、样本等）在室温（20-25℃）下平衡至少 30分钟。
注意：如果浓缩洗涤液有结晶，需置于37℃水浴助溶并混匀。
标准品稀释：按照说明书要求，使用专用稀释液对标准品进行梯度稀释（通常做7-8个浓度点），现配现用。
样本处理：确保血清、血浆或细胞上清液澄清无沉淀（如有沉淀需再次离心）。
第二阶段：加样与孵育
加样：
在酶标板的对应孔中，分别加入 100 µL（具体体积看说明书）稀释好的标准品和待测样本。
设置空白孔（只加稀释液）。
建议：每个样本做2-3个复孔，数据更可靠。
孵育：
盖上封板膜，放入 37℃ 恒温箱孵育 1-2小时（或按说明书要求，如室温2小时）。
原理：让样本中的抗原与板上的捕获抗体结合。
第三阶段：洗板与检测抗体
洗板（关键步骤）：
弃去孔内液体，每孔加满洗涤液（约300-350 µL），静置浸泡 30-60秒 后甩干。
重复洗涤 3-5次。最后一次需在吸水纸上用力拍干，确保无残留液体。
加检测抗体：
每孔加入 100 µL 稀释好的检测抗体工作液（生物素化抗体）。
盖上封板膜，37℃ 孵育 1小时。
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ELISA试剂盒性能指标速查表
性能指标 关键参数 优质标准参考 意义
灵敏度 最低检测限 (LoD) 数值越低越好 能否测出微量样本
特异性 交叉反应率 < 5% (越低越好) 是否只测目标物，不误判
精密度 变异系数 (CV) 批内 < 10%, 批间 < 15% 结果是否稳定、可重复
准确性 回收率 80% - 120% 结果是否接近真实值
线性范围 标准曲线区间 覆盖样本预期浓度 能否准确定量高低浓度
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