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人CD146分子(CD146)ELISA试剂盒
检测原理：人CD146 ELISA试剂盒通常采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）。这是目前检测蛋白抗原最常用且特异性较高的方法。
具体步骤如下：
包被与捕获：酶标板（固相载体）上预先包被了针对人CD146的特异性捕获抗体（通常为鼠抗人CD146单克隆抗体）。
抗原结合：加入样本（血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆或脑脊液等）或标准品，样本中的CD146抗原（膜型或可溶性sCD146）会与固相上的捕获抗体特异性结合。
检测抗体结合：洗去未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体（或生物素标记抗体+酶标亲和素）。该抗体识别CD146分子上的另一个抗原表位，从而形成“固相抗体-CD146-酶标抗体”的夹心复合物。
显色反应：加入底物溶液（通常为TMB）。TMB在HRP的催化下由无色变为蓝色。
终止与读数：加入终止液（如硫酸），反应终止，溶液颜色由蓝色变为黄色。颜色的深浅与样本中CD146的浓度呈正相关。使用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样本浓度。
产品名称：人CD146分子(CD146)ELISA试剂盒
英文名称：Human CD146 ELISA Kit
规格：48T/96T
货号：LZ-E031085
用途：仅供科研研究实验
核心概览：
参数项目 典型数值/描述 说明
检测范围 0.312 – 20 ng/mL
(或 15.6 – 1000 pg/mL) 覆盖生理及病理状态下的常见浓度范围。
灵敏度 < 0.15 ng/mL
(典型值约 0.112 ng/mL 或 < 40 pg/mL) 高灵敏度，可检测低水平的sCD146。
特异性 高特异性 专一识别人CD146/MCAM，与其他免疫球蛋白超家族成员无明显交叉反应。
精密度 (CV) 批内 < 10%
批间 < 12% - 15% 变异系数越低，说明实验重复性越好。
检测流程简要：
第一阶段：准备工作 (Pre-preparation)
试剂回温：从冰箱取出试剂盒，将所有试剂（包括浓缩洗涤液、标准品、样本等）在室温（20-25℃）下平衡至少 30分钟。
注意：如果浓缩洗涤液有结晶，需置于37℃水浴助溶并混匀。
标准品稀释：按照说明书a要求，使用专用稀释液对标准品进行梯度稀释（通常做7-8个浓度点），现配现用。
样本处理：确保血清、血浆或细胞上清液澄清无沉淀（如有沉淀需再次离心）。
第二阶段：加样与孵育
加样：
在酶标板的对应孔中，分别加入 100 µL（具体体积看说明书）稀释好的标准品和待测样本。
设置空白孔（只加稀释液）。
建议：每个样本做2-3个复孔，数据更可靠。
孵育：
盖上封板膜，放入 37℃ 恒温箱孵育 1-2小时（或按说明书要求，如室温2小时）。
原理：让样本中的抗原与板上的捕获抗体结合。
第三阶段：洗板与检测抗体
洗板（关键步骤）：
弃去孔内液体，每孔加满洗涤液（约300-350 µL），静置浸泡 30-60秒 后甩干。
重复洗涤 3-5次。最后一次需在吸水纸上用力拍干，确保无残留液体。
加检测抗体：
每孔加入 100 µL 稀释好的检测抗体工作液（生物素化抗体）。
盖上封板膜，37℃ 孵育 1小时。
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标准曲线：每次实验都必须重新制作标准曲线，不可沿用旧数据。
洗涤步骤：洗涤不充分是导致误差的主要原因，需严格按照说明书洗板（通常3-5次）。
用途限制：此类试剂盒通常仅供科研使用，不可用于临床诊断
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