人CD6分子(CD6)ELISA试剂盒
检测原理:
包被与结合:试剂盒的酶标板预先包被了特异性的捕获抗体(抗人CD6单克隆抗体)。加入样本或标准品后,样本中的CD6抗原会与包被抗体特异性结合。
形成免疫复合物:洗去未结合的成分后,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体(抗人CD6抗体)。该检测抗体与已结合的CD6抗原结合,形成“包被抗体-CD6抗原-酶标抗体”的夹心免疫复合物。
显色反应:再次洗涤去除未结合的酶标抗体后,加入显色底物(TMB)。在HRP的催化下,TMB呈现蓝色,加入终止液(通常为硫酸)后变为黄色。
结果测定:颜色的深浅与样本中CD6的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过绘制标准曲线计算样本浓度。
产品名称:
人CD6分子(CD6)ELISA试剂盒
英文名称:Human cluster of differentiation 6,CD6 ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E031067
用途:仅供科研研究实验
核心概览:
参数 典型范围/数值
灵敏度 常见数值如 < 10 pg/mL 或更低(具体视抗体亲和力而定)。
检测范围 常见范围如 15.6 - 1000 pg/mL 或 31.25 - 2000 pg/mL。
特异性 能够特异性检测人CD6,与其他免疫细胞表面分子无明显交叉反应。
重复性 板内变异系数(CV)通常 < 10%,板间变异系数 < 12%。
标准曲线 典型浓度梯度可能为:0, 31.25, 62.5, 125, 250, 500, 1000, 2000 pg/mL。
适用样本类型:
该试剂盒适用于多种生物样本,主要包括:
血清
血浆(如EDTA、肝素抗凝)
细胞培养上清液
组织匀浆
细胞裂解液
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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