大鼠牙周膜成纤维细胞

细胞简介：

大鼠牙周膜成纤维分离自牙周膜组织；牙周膜（牙周韧带、牙周间隙）是由致密结缔组织所构成。多数纤维排列成束，纤维的一端埋于牙骨质内，另一端则埋于牙槽窝骨壁里，使牙齿固位于牙槽窝内；牙周膜内有神经、血管、淋巴和上皮细胞等。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的牙周膜成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。牙周膜成纤维细胞（PLFs）作为牙周膜的主体细胞，是牙周膜主要的间质细胞，它不仅具有合成胶原、基质、弹力纤维和糖蛋白的功能，还有吸收胶原吞噬异物的能力，还参与了牙周组织的病变、修复及再生过程。现在，利用牙周膜细胞建立体外模型，已经成为有关员研究牙周组织疾病的重要手段。
方法简介  公司实验室分离的大鼠牙周膜成纤维采用胶原酶-联合消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测  公司实验室分离的大鼠牙周膜成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
培养条件参考：
1‌、培养基‌：含10%胎牛血清（FBS）的专用内皮细胞培养基或DMEM
2‌、气体环境‌：95%空气 + 5% CO₂，37℃恒温培养
3‌、传代比例‌：1:2 至 1:6，当细胞密度达80%-90%时进行
4‌、包被要求‌：建议使用PLL（0.1mg/ml）或明胶（0.1%）预处理培养瓶
传代操作步骤：
1、弃去旧培养基，用不含钙镁离子的PBS轻柔润洗1–2次 。
2、加入 ‌0.25%胰蛋白酶‌（含或不含EDTA）1–2 mL，37℃消化1–2分钟 。
3、显微镜下观察：当细胞边缘回缩、间隙增大但未完全脱落时，加入含血清的完全培养基终止消化 。
4、轻柔吹打使细胞脱落，收集悬液于15 mL离心管中，‌1000 rpm离心5分钟‌，弃上清。
5、用新鲜培养基重悬细胞，按 ‌1:2 至 1:4‌ 比例分瓶接种 。
6、放入培养箱继续培养，次日观察贴壁情况。
公司正在出售的产品：

血液诱导型巨噬细胞一氧化氮合成酶（（iNOS /NOS2/mNOS））活性比色法定量检测试剂盒	肌酸激酶同工酶CKMB抗体
酒类L－苹果酸比色法定量检测试剂盒	磷酸二酯酶4B（Phosphodiesterase 4B）
细菌MUELLER HINTON琼脂平板	人体hTERT表达实时定量检测试剂盒
TEM电镜石蜡切片免疫组织化学AP酶联NBT/BCIP直接检测试剂盒（含AP一抗）	PDZ结构域PDZK6蛋白抗体
石蜡切片组织CASPASE-8蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒	高尔基体膜蛋白GP73抗体
细胞PKD2激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）	周期素依赖性激酶4抗体
石蜡切片组织TNF ALPHA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒	炭疽杆菌致死因子LF抗体
细胞色素P450 11A1重组鼠单克隆抗体	EIF2D蛋白抗体
RhoC鸟苷酸酶活性分析试剂盒	磷脂酶DDHD1抗体
细菌过氧化氢酶检测试剂盒	蛋白激酶A受体2α亚基抗体
组织GRK2激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）	大鼠牙周膜成纤维细胞8号染色体开放阅读框34抗体
阳离子通道精子相关蛋白4抗体	酪氨酸磷酸酶α抗体
人椎间盘纤维环细胞	小鼠子宫韧带成纤维细胞
Human Umbilical Vein Endothelial Cells	Primary human cervical epithelial cells；HCerEpC；HCerEpiC

收货处理：

1‌、外包装消毒‌：用75%酒精喷洒瓶身及瓶盖，静置30秒后放入超净台 。
‌2、静置恢复‌：将细胞瓶直接放入37℃、5% CO₂培养箱中‌静置3–4小时‌，不建议立即开盖操作 。
3‌、显微镜检查‌：
观察细胞贴壁率、形态是否正常；
拍照记录（建议40x、100x、200x），作为售后依据 ；
若漂浮细胞较多，可静置过夜观察是否重新贴壁。
‌4、处理决策‌：
贴壁率 <85%：更换培养基继续观察；
贴壁率 ≥85%：可直接传代。

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