人鳞状细胞癌相关抗原(SCCAg)试剂盒
检测原理:
双抗体夹心法的核心步骤如下:
固相抗体包被:试剂盒的酶标板孔内预先包被了能特异性捕获人SCCAg的抗体(捕获抗体)。
抗原抗体结合:向孔中加入样本(如血清、血浆)或标准品,样本中的SCCAg(抗原)会与固相抗体结合。
形成“夹心”复合物:洗去未结合的物质后,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的SCCAg检测抗体。该抗体能与SCCAg的另一个位点特异性结合,从而形成“固相抗体-SCCAg抗原-酶标抗体”的夹心复合物。
显色与测定:再次洗涤后,加入显色底物(如TMB)。HRP会催化底物发生颜色反应(通常由无色变为蓝色),加入终止液后变为黄色。颜色的深浅与样本中SCCAg的浓度成正比。最后,使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)。
通过测定一系列已知浓度标准品的OD值绘制标准曲线,即可根据样本的OD值计算出其中SCCAg的浓度。
产品名称:
人鳞状细胞癌相关抗原(SCCAg)ELISA试剂盒
英文名称:Human squamous cell carcinoma related antigen,SCCAg ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E029618
用途:仅供科研研究实验
核心参数概览:
检测范围 试剂盒能够准确定量的浓度区间。 需参考具体说明书,例如 0.3 - 50 ng/mL。
灵敏度 能够检测到的最低SCCAg浓度。 需参考具体说明书,例如 < 0.1 ng/mL。
参考区间 正常人群血清中SCCAg的浓度范围。 通常 < 1.5 ng/mL(或 < 1.5 μg/L)。各实验室应建立自己的参考区间。
样本类型 适用于检测的生物样本种类。 血清、血浆。
特异性 只与目标分子(SCCAg)反应,不与其他物质交叉反应。 对SCCAg具有高度特异性。
适用样本类型:
该试剂盒适用于多种生物样本,主要包括:
血清
血浆(如EDTA、肝素抗凝)
细胞培养上清液
组织匀浆
细胞裂解液
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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