原代细胞(Primary Cells)是指直接从生物体组织或器官中分离并立即进行体外培养的初始细胞。
与经过长期传代、遗传特性可能改变的细胞系不同,原代细胞因其离体时间短,
最大限度地保留了来源组织的原始遗传背景、生物学特性和生理功能,能够更真实地反映细胞在体内的状态。
尽管其增殖能力有限,培养难度相对较高,但凭借其高度的体内相关性,原代细胞在药物筛选、
毒理研究、疾病模型构建、基因功能分析及再生医学等前沿领域,已成为不可或缺的关键研究工具
细胞简介:

大鼠下丘脑神经元分离自下丘脑;下丘脑又称丘脑下部,位于大脑腹面、丘脑的下方,是调节内脏活动和内分泌活动的较高级神经中枢所在。下丘脑自前向后可分三部﹐即前部(又名视前区和视上区)﹑中部(结节区)和后部(乳头体区)。下丘脑具有许多细胞核团和纤维束﹐与中枢神经系统的其它部位具有密切的相互联系。它不仅通过神经和血管途径调节脑垂体前﹑后叶激素的分泌和释放﹐而且还参与调节自主神经系统﹐如控制水盐代谢﹑调节体温﹑摄食﹑睡眠﹑生殖、内脏活动以及情绪等。下丘脑神经元与来自其他部位的神经纤维有广泛的突触联系,可以接受很多神经冲动,为内分泌系统和神经系统的中心。它们能调节垂体前叶功能,合成神经垂体激素及控制自主神经和植物神经功能。故提取下丘脑神经元进行体外培养,建立下丘脑神经元体外实验平台具有重要意义。
方法简介 公司实验室分离的大鼠下丘脑神经元采用消化法结合神经元专用培养基培养、化学试剂抑制法筛选制备而来,细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠下丘脑神经元经β-Tubulin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件 PLL(0.1mg/ml)
培养基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 神经元细胞样
传代特性 属于终末分化细胞;属于不增殖细胞群
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞分离步骤:
从液体样本中分离细胞
对于血液、骨髓、腹水等本身就是细胞悬液的样本,分离过程主要基于细胞的物理特性(如密度、大小)或生物学特性(如表面标志物)进行纯化。
1. 密度梯度离心法
这是从外周血中分离外周血单个核细胞(PBMCs,主要包括淋巴细胞和单核细胞)最常用的方法。
原理:利用不同细胞的密度差异。通过离心,使细胞在特定密度的分离液(如Ficoll-Hypaque,密度为1.077 g/ml)中分层。
简要步骤:
将抗凝血用PBS等倍稀释。
小心地将稀释后的血液叠加在密度梯度分离液的上层,保持清晰的界面。
在室温下进行水平离心(如2000 rpm,20分钟,升降速要慢)。
离心后,试管中会形成清晰的层次:最上层是血浆和血小板,中间灰白色的薄层是PBMCs,下层是分离液和红细胞/粒细胞。
小心吸取中间的PBMC层,用缓冲液洗涤离心2次,即可获得较纯的单个核细胞。
2. 基于细胞特性的分离方法
当需要更高纯度的特定细胞亚群时,会采用以下技术:
贴壁筛选法:利用某些细胞(如单核细胞、成纤维细胞)能够贴附在培养皿表面生长,而其他细胞(如淋巴细胞)不能贴壁的特性,通过简单的换液操作即可分离。
流式细胞分选术 (FACS):一种高精度、高通量的细胞分选技术。它利用荧光标记的特异性抗体识别细胞表面的特定分子,通过仪器将单个细胞液滴带上不同电荷,在电场中偏转,从而将目标细胞从混合群体中精确地分选出来,纯度可达95%以上。
免疫磁珠法 (MACS):一种操作简便、快速且能获得高纯度细胞的方法。将特异性抗体包被在磁性微球上,与细胞悬液孵育后,抗体与目标细胞结合。然后将混合液通过置于磁场中的分离柱,结合了磁珠的细胞被吸附在柱内,未结合的细胞则流出。移出磁场后,即可洗脱得到高纯度的目标细胞,纯度可达95%-99%。
收货处理:

1、外包装消毒:用75%酒精喷洒瓶身及瓶盖,静置30秒后放入超净台 。
2、静置恢复:将细胞瓶直接放入37℃、5% CO₂培养箱中静置3–4小时,不建议立即开盖操作 。
3、显微镜检查:
观察细胞贴壁率、形态是否正常;
拍照记录(建议40x、100x、200x),作为售后依据 ;
若漂浮细胞较多,可静置过夜观察是否重新贴壁。
4、处理决策:
贴壁率 <85%:更换培养基继续观察;
贴壁率 ≥85%:可直接传代。
公司正在出售的产品:
| 血清脊髓过氧化酶(MPO)活性高质敏感比色法定量检测试剂盒 |
肌球蛋白2抗体 |
| 糖类甘露糖比色法定量检测试剂盒 |
植物染色质免疫沉淀分析(CHIP)试剂盒 |
| 水样品内毒素比色法定量检测试剂盒 |
植物细胞周期G0期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒 |
| TEM电镜冰冻切片免疫组织化学HRP酶联DAB间接检测试剂盒 |
PE-Cy7标记人CD16单克隆抗体 |
| 石蜡切片组织CASPASE-10蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
钙依赖膜结合蛋白Copine蛋白9抗体 |
| 组织RSK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
周期素B1抗体 |
| 石蜡切片组织CASPASE-10蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
胎盘蛋白6抗体 |
| 细胞角蛋白18重组兔单克隆抗体 |
EB病毒核抗原-3C抗体 |
| 磷酸二酯酶(Phosphodiesterase;PDE) |
硫氧还蛋白还原酶抗体 |
| 通用型大肠杆菌(E. Coli)鉴定 |
弹性蛋白微原纤维界面因子1抗体 |
| 细胞WEE1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
大鼠下丘脑神经元细胞7号染色体开放阅读框46抗体 |
| 延伸因子G2抗体 |
酪氨酸蛋白激酶SgK223抗体 |
| 大鼠三叉神经星形胶质细胞 |
兔星形胶质细胞 |
| Rat Intestinal Mucosal Epithelial Cells |
Rat femoral artery smooth muscle cells |
原代细胞与细胞系的比较:
比较维度 原代细胞 细胞系
来源 直接从活体组织分离 由原代细胞或肿瘤组织经长期传代或转化形成
生物学真实性 高,最接近体内状态 较低,长期培养可能导致特性丢失或改变
遗传背景 稳定,通常为二倍体 不稳定,常发生基因突变和染色体异常
细胞群体 异质性,可能包含多种细胞 均质性,来源于单个克隆,背景单一
增殖能力 有限,会衰老死亡 无限,可长期传代
主要应用 药物筛选、毒理研究、个性化医疗 高通量筛选、机制研究、大规模生产