细胞简介:

大鼠胃黏膜上皮分离自胃黏膜组织;胃黏膜柔软,活体呈橘红色。胃空虚时形成许多皱襞,充盈时变平坦。幽门处的黏膜形成环形皱襞,突向腔内称幽门瓣。胃黏膜可分为三层,即上皮层(单层柱状上皮)、固有层(由结缔组织构成、含有大量的胃腺)和黏膜肌层(为薄层平滑肌、排列成内环外纵)。胃黏膜上皮细胞源自胃黏膜的上皮层,细胞为单层柱状上皮,排列整齐,能分泌黏液覆盖于胃黏膜的表面,防止胃酸和对胃黏膜的损害。体外培养胃黏膜上皮细胞为研究细胞功能及致病因子、药物、激素对细胞的损伤、保护和功能调控提供了简单而的模型。
方法简介 公司实验室分离的大鼠胃黏膜上皮采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠胃黏膜上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
生物学特性:
原代细胞的核心价值在于其高度的生理相关性,这主要体现在以下几个方面:
高度模拟体内状态
原代细胞直接从机体取出,离体时间短,因此最大程度地保留了其来源组织的遗传特征、基因表达谱、代谢功能和细胞间相互作用。这使得它们能够真实地反映细胞在体内的生长状态和对各种刺激的反应。
有限的增殖能力
与可以无限增殖的细胞系不同,原代细胞是正常的、未经转化的细胞,其分裂能力有限。它们通常只能传代10次以内(通常将第1至第10代的细胞统称为原代细胞),随后便会进入衰老期并死亡,这一现象与“海弗利克极限”有关。
遗传稳定性
原代细胞通常保持正常的二倍体染色体数目,遗传物质未发生改变。这确保了实验结果的准确性,避免了因长期体外培养导致的基因突变或染色体异常。
细胞异质性
从组织中分离的原代细胞群体可能包含多种细胞类型,例如在培养上皮细胞时,常常会伴随有成纤维细胞的生长。这种异质性在一定程度上反映了体内组织的真实构成,但也对细胞的纯化提出了要求。
基本参数:
在实际操作和应用中,原代细胞表现出以下基本参数特征:
参数维度 特征描述
来源与制备 直接来源于人或动物的新鲜组织、器官、外周血或胚胎。通常使用胰蛋白酶、胶原酶等进行酶消化,或采用机械法分散获得单个细胞悬液。
培养条件 培养要求较为苛刻,需要特定的培养基、生长因子和适宜的贴壁表面(如经细胞外基质蛋白包被),且对无菌操作要求极高。
生长特性 生长相对缓慢,增殖能力弱。不同来源的细胞增殖能力不同,例如骨骼肌细胞可传代10-12代,而上皮细胞通常在3-4代后成纤维细胞会成为优势细胞。
成本与周期 分离和培养过程耗时、费力,且成本较高。由于增殖能力有限,不适合大规模、长期的实验。
公司正在出售的产品:
| 组织脊髓过氧化酶(MPO)活性比色法定量检测试剂盒 |
肌球蛋白轻链激酶3抗体 |
| 通用型果糖比色法定量检测试剂盒 |
果菜类食物DNA分离试剂盒 |
| 细菌抗生素(链)敏感性DISC弥散(KIRBY-BAUER)检测试剂盒 |
植物细胞周期S早期同步(SYNCHRONY)处理试剂盒 |
| TEM电镜冰冻切片免疫组织化学AP酶联NBT/BCIP直接检测试剂盒 |
PE-Cy7标记人CD79b单克隆抗体 |
| 石蜡切片组织CASPASE-10蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
钙依赖膜结合蛋白Copine蛋白4抗体 |
| 组织多巴胺(dopamine)比色法定量检测试剂盒 |
周期素D相互作用蛋白1抗体 |
| 石蜡切片组织CASPASE-10蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
胎盘蛋白11抗体 |
| 细胞角蛋白16重组兔单克隆抗体 |
EFHD2蛋白抗体 |
| 植物染色质免疫沉淀分析(CHIP)完全试剂盒(包括抗体) |
硫氧还蛋白11抗体 |
| 细菌结晶紫选择琼脂平板 |
蛋氨酸亚砜还原酶MSRA抗体 |
| 组织ABL1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
大鼠胃黏膜上皮细胞7号染色体开放阅读框42抗体 |
| 延伸因子EF-1 γ抗体 |
酪氨酸蛋白激酶BTK抗体 |
| 大鼠大隐静脉平滑肌细胞 |
猪胸腺基质细胞 |
| Rat Intestinal Smooth Muscle Cells |
Primary human NK cells |
关键注意事项:
无菌操作 这是细胞培养的生命线。操作前需对超净台进行紫外灭菌,操作过程要规范、迅速,避免污染。
消化控制 酶消化是关键步骤。消化时间过长会损伤细胞,过短则解离不充分。需根据组织类型和酶活性灵活调整。
细胞状态 原代细胞非常脆弱,尤其是首次传代时,应保证较高的接种密度,否则细胞难以生长。
冻存策略 原代细胞不建议在P0代直接冻存。通常建议在细胞状态较好的P2或P3代进行冻存,以保证复苏后的活性。