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| 销售商： 抚州翊立飒生物科技开发有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
商品属性：
细胞简介 ：
| 产品名称 | 大鼠食管平滑肌细胞 |
| 英文名称 | Rat Esophageal Smooth Muscle Cells |
| 组织来源 | 食管组织 |
| 默认种属 | 大鼠 |
| 产品货号 | YLS-XB11184 |
大鼠食管平滑肌分离自食管组织；食管可分为颈段、胸段和腹段，脊椎动物食管的颈段位于气管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之间的纵膈内，胸段通过膈孔与腹腔内腹相连，腹段很短与胃相连。哺乳动物的食管结构上由内向外分四层：黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜。其中，肌层上1/3段为骨骼肌，下1/3为平滑肌，中段为骨骼肌和平滑肌混合组成。其中，肌纤维的排列方式分为内环形和外纵形两层。食管的蠕动是由食管平滑肌收缩严格控制，食管还有括约肌，位于环状软骨水平的，称为食管上括约肌；位于食管下端，一部分在膈上，穿过膈孔，另一部分在膈下的高压带，称为食管下括约肌。食管平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。
方法简介 公司实验室分离的大鼠食管平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠食管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
关键操作流程：
方法简介 公司实验室分离的大鼠食管平滑肌采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠食管平滑肌经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
关键操作流程：
原代细胞的制备是整个实验成功的基础，其核心在于将组织分散成单个活细胞。
1. 组织取材与预处理
无菌操作：整个过程必须在超净台内严格无菌进行，所有器械和溶液都需灭菌。
快速处理：组织从生物体取出后应尽快处理，以维持细胞活力。若不能立即处理，需在4℃条件下短期保存。
清洗与剪切：用预冷的PBS或Hank's液反复冲洗组织，去除血污和杂物。然后用无菌眼科剪将组织剪成约1mm³的微小碎块。
2. 细胞分离方法
根据组织类型和研究目的，主要有以下三种分离策略：
分离方法 原理与适用组织 优点 缺点
酶消化法 利用酶（如胰蛋白酶、胶原酶）降解细胞间质，适用于肝、肾、皮肤、肿瘤等大多数实体组织。 细胞得率高，分离效果好，是最常用的方法。 酶可能对细胞造成损伤，需精确控制消化时间和温度。
组织块培养法 将组织块直接贴附于培养瓶，细胞从边缘自然迁出。适用于上皮、胚胎等细胞间质少的组织。 操作简单，对细胞损伤小，能较好保留细胞特性。 细胞迁出和增殖周期长，得率相对较低。
机械分散法 通过剪切、研磨、筛网过滤或吸管吹打等物理方式分散组织，适用于脑组织等柔软样本。 快速，避免了酶对细胞的潜在毒性。 细胞损伤大，得率和存活率低，易形成细胞团块。
常用酶简介
胰蛋白酶 (Trypsin)：作用强，适用于细胞间质较少的软组织。其活性依赖不含钙、镁离子的环境。
胶原酶 (Collagenase)：特异性水解胶原蛋白，对细胞损伤小，尤其适用于富含结缔组织的坚硬器官（如乳腺、骨、软骨）。
3. 细胞培养与观察
终止消化：酶消化后，需加入含血清的培养基来终止反应，因为血清中含有抑制胰蛋白酶活性的因子。
过滤与接种：通过细胞滤网过滤，去除未消化的组织块，离心收集细胞后用完全培养基重悬，接种到培养瓶中。
耐心观察：原代细胞生长通常较缓慢，可能需要24小时甚至更长时间才能在镜下观察到贴壁的细胞。
常见难点与解决方案：
原代培养常被称为“玄学”，主要因为以下痛点：
1. 细胞不贴壁或死亡率高
原因： 消化过度、物理损伤或“失巢凋亡”。
对策： 优化酶浓度和时间；在培养基中添加 ROCK抑制剂 或特定的贴壁因子（如层粘连蛋白、纤连蛋白）。
2. 杂细胞污染（主要是成纤维细胞）
现象： 成纤维细胞生长极快，会迅速淹没目的细胞（如上皮细胞）。
对策：
差速贴壁法： 利用成纤维细胞贴壁快（1-2小时）的特性，先让其在培养瓶贴壁，收集未贴壁的悬液（含目的细胞）进行培养。
抑制剂法： 使用阿糖胞苷或特定抗体清除杂细胞。
3. 批次差异大
原因： 供体年龄、健康状况、取材部位不同。
对策： 尽量使用同一批次冻存的细胞进行实验；或者在实验设计时增加生物学重复。
公司正在出售的产品：
| 组织灌注固着液（4％中性多聚甲醛固着液） | 环指蛋白185抗体 |
| 调料D-葡萄糖酸内脂比色法定量检测试剂盒 | 高纯胞浆S100蛋白制备试剂盒 |
| 细菌细胞色素氧化酶活性比色法定量检测试剂盒 | HOECHST 33342和PROPIDIUM IODIDE细胞膜变检测试剂盒 |
| PROTEINASE K酶解法石蜡切片抗原修复处理试剂盒 | OTUD6B蛋白抗体 |
| 冰冻切片组织INSULIN 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 | 谷氧还蛋白/巯基转移酶抗体 |
| 细胞ROS激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | 猪源产肠毒素性大肠杆菌K99抗体 |
| 载玻片细胞P35蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶TNN13K抗体 |
| 磷酸化组蛋白H2AX重组兔单克隆抗体 | DNAJB8蛋白抗体 |
| BPE蛋白标记试剂盒（不含BPE） | 卵黄状黄斑病蛋白3抗体 |
| 细胞脯羟化酶（prolil hydroxylase）活性比色法定量检测试剂盒 | 蛋白磷酸酶1调节亚基3C抗体 |
| 细胞基质金属2（MMP2）原位明胶酶谱法（in situ ?zymography）荧光染色试剂盒 | 大鼠食管平滑肌细胞9号染色体开放阅读框75抗体 |
| 嗅觉受体5K3抗体 | 卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD3抗体 |
| 人软骨细胞 | 大鼠神经胶质细胞 |
| Rat Pulmonary Great Vein Endothelial Cells | Human primary neural stem cells |
手机版：大鼠食管平滑肌细胞
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