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| 销售商： 抚州翊立飒生物科技开发有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
商品属性：
细胞简介 ：
| 产品名称 | 大鼠胚胎成纤维细胞 |
| 英文名称 | Rat Embryonic Fibroblast Cells |
| 组织来源 | 胚胎组织 |
| 默认种属 | 大鼠 |
| 产品货号 | YLS-XB11383 |
大鼠胚胎成纤维分离自胚胎；成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的胚胎成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。该细胞常用作ES细胞培养常用的饲养层细胞，能产生抑制ES细胞自主分化和促进ES细胞增殖的因子，故能有效地促进ES细胞的增殖并维持其未分化特性和多潜能性，且分泌效果优于外源添加的一些因子，而且可以为ES细胞的培养提供类似于体内的微环境，故在研究哺乳动物ES细胞中得到广泛使用。
方法简介 公司实验室分离的大鼠胚胎成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠胚胎成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
关键操作流程：
方法简介 公司实验室分离的大鼠胚胎成纤维采用-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠胚胎成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
关键操作流程：
原代细胞的制备是整个实验成功的基础，其核心在于将组织分散成单个活细胞。
1. 组织取材与预处理
无菌操作：整个过程必须在超净台内严格无菌进行，所有器械和溶液都需灭菌。
快速处理：组织从生物体取出后应尽快处理，以维持细胞活力。若不能立即处理，需在4℃条件下短期保存。
清洗与剪切：用预冷的PBS或Hank's液反复冲洗组织，去除血污和杂物。然后用无菌眼科剪将组织剪成约1mm³的微小碎块。
2. 细胞分离方法
根据组织类型和研究目的，主要有以下三种分离策略：
分离方法 原理与适用组织 优点 缺点
酶消化法 利用酶（如胰蛋白酶、胶原酶）降解细胞间质，适用于肝、肾、皮肤、肿瘤等大多数实体组织。 细胞得率高，分离效果好，是最常用的方法。 酶可能对细胞造成损伤，需精确控制消化时间和温度。
组织块培养法 将组织块直接贴附于培养瓶，细胞从边缘自然迁出。适用于上皮、胚胎等细胞间质少的组织。 操作简单，对细胞损伤小，能较好保留细胞特性。 细胞迁出和增殖周期长，得率相对较低。
机械分散法 通过剪切、研磨、筛网过滤或吸管吹打等物理方式分散组织，适用于脑组织等柔软样本。 快速，避免了酶对细胞的潜在毒性。 细胞损伤大，得率和存活率低，易形成细胞团块。
常用酶简介
胰蛋白酶 (Trypsin)：作用强，适用于细胞间质较少的软组织。其活性依赖不含钙、镁离子的环境。
胶原酶 (Collagenase)：特异性水解胶原蛋白，对细胞损伤小，尤其适用于富含结缔组织的坚硬器官（如乳腺、骨、软骨）。
3. 细胞培养与观察
终止消化：酶消化后，需加入含血清的培养基来终止反应，因为血清中含有抑制胰蛋白酶活性的因子。
过滤与接种：通过细胞滤网过滤，去除未消化的组织块，离心收集细胞后用完全培养基重悬，接种到培养瓶中。
耐心观察：原代细胞生长通常较缓慢，可能需要24小时甚至更长时间才能在镜下观察到贴壁的细胞。
常见难点与解决方案：
原代培养常被称为“玄学”，主要因为以下痛点：
1. 细胞不贴壁或死亡率高
原因： 消化过度、物理损伤或“失巢凋亡”。
对策： 优化酶浓度和时间；在培养基中添加 ROCK抑制剂 或特定的贴壁因子（如层粘连蛋白、纤连蛋白）。
2. 杂细胞污染（主要是成纤维细胞）
现象： 成纤维细胞生长极快，会迅速淹没目的细胞（如上皮细胞）。
对策：
差速贴壁法： 利用成纤维细胞贴壁快（1-2小时）的特性，先让其在培养瓶贴壁，收集未贴壁的悬液（含目的细胞）进行培养。
抑制剂法： 使用阿糖胞苷或特定抗体清除杂细胞。
3. 批次差异大
原因： 供体年龄、健康状况、取材部位不同。
对策： 尽量使用同一批次冻存的细胞进行实验；或者在实验设计时增加生物学重复。
公司正在出售的产品：
| 细胞半胱-7（CASPASE-7）活性比色法定量检测试剂盒 | 基质金属蛋白酶-9抗体 |
| 通用型硝酸盐含量比色法定量检测试剂盒 | 空调清洁剂 |
| 细胞HSV2（HERPES SIMPLX2）病毒定性检测试剂盒 | 组织氧化应激活性氧（ROS）比色法测定试剂盒（单线态氧气） |
| HARRIS苏木素复染试剂盒 | PE标记小鼠CD45RB单克隆抗体 |
| 载玻片细胞CREB蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | 干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白2抗体 |
| 细胞果糖1,6-二磷酸酶（fructose 1, 6-diphosphatase）活性比色法定量检测试剂盒 | 肿瘤抑制蛋白18抗体 |
| 细胞BAX蛋白表达荧光定量检测试剂盒 | 四分子交联体16抗体（四旋蛋白） |
| 肾小球裂孔膜蛋白PDCN重组兔单克隆抗体 | ETV3蛋白抗体 |
| 石蜡切片脂质尼罗红直接染色试剂盒 | 膜相关蛋白样蛋白NUMBL抗体 |
| 细菌葡萄糖酵解溴百里酚蓝（BTB）琼脂平板 | 单羧酸转运14抗体 |
| 细胞AURORA-B激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | 大鼠胚胎成纤维细胞4号染色体开放阅读框14抗体 |
| 血小板白细胞C激酶底物同源结构域M2抗体 | 跨膜蛋白SEMA4B抗体 |
| 大鼠肺动脉成纤维细胞 | 猪乳腺上皮细胞 |
| Rabbit Lymphatic Endothelial Cells | Porcine Aortic Endothelial Cells |
手机版：大鼠胚胎成纤维细胞
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