细胞简介:

大鼠脑动脉血管内皮分离自脑动脉组织;脑动脉有成对的颈内动脉和椎动脉互相衔接成动脉循环;静脉系多不与同名动脉拌行,所收集的静脉血先进入静脉窦再汇入颈内静脉;各级静脉都没有瓣膜,它包括脑的动脉系统和脑的静脉系统。脑动脉血管内皮细胞主要功能:①维持血管内外的动态平衡;②合成和分泌细胞因子和介质;③维持凝血和纤溶的动态平衡。
方法简介 公司实验室分离的大鼠脑动脉血管内皮采用胶原酶-混合消化法并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠脑动脉血管内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
生物学特性:
原代细胞的核心价值在于其高度的生理相关性,这主要体现在以下几个方面:
高度模拟体内状态
原代细胞直接从机体取出,离体时间短,因此最大程度地保留了其来源组织的遗传特征、基因表达谱、代谢功能和细胞间相互作用。这使得它们能够真实地反映细胞在体内的生长状态和对各种刺激的反应。
有限的增殖能力
与可以无限增殖的细胞系不同,原代细胞是正常的、未经转化的细胞,其分裂能力有限。它们通常只能传代10次以内(通常将第1至第10代的细胞统称为原代细胞),随后便会进入衰老期并死亡,这一现象与“海弗利克极限”有关。
遗传稳定性
原代细胞通常保持正常的二倍体染色体数目,遗传物质未发生改变。这确保了实验结果的准确性,避免了因长期体外培养导致的基因突变或染色体异常。
细胞异质性
从组织中分离的原代细胞群体可能包含多种细胞类型,例如在培养上皮细胞时,常常会伴随有成纤维细胞的生长。这种异质性在一定程度上反映了体内组织的真实构成,但也对细胞的纯化提出了要求。
基本参数:
在实际操作和应用中,原代细胞表现出以下基本参数特征:
参数维度 特征描述
来源与制备 直接来源于人或动物的新鲜组织、器官、外周血或胚胎。通常使用胰蛋白酶、胶原酶等进行酶消化,或采用机械法分散获得单个细胞悬液。
培养条件 培养要求较为苛刻,需要特定的培养基、生长因子和适宜的贴壁表面(如经细胞外基质蛋白包被),且对无菌操作要求极高。
生长特性 生长相对缓慢,增殖能力弱。不同来源的细胞增殖能力不同,例如骨骼肌细胞可传代10-12代,而上皮细胞通常在3-4代后成纤维细胞会成为优势细胞。
成本与周期 分离和培养过程耗时、费力,且成本较高。由于增殖能力有限,不适合大规模、长期的实验。
公司正在出售的产品:
| 20%Formalin固着液 |
激活素受体1B抗体 |
| 酒类精比色法定量检测试剂盒 |
可溶性包涵体蛋白复性(化学稀释I)试剂盒 |
| 麻风杆菌(Leprosy Bacilli)染色试剂盒 |
白细胞增长培养液 |
| GMS10甲基化基因电转感受态细菌 |
PE-Cy5.5标记小鼠CD45R单克隆抗体 |
| CASPASE-6蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 |
蝮蛇蛇毒蛋白抗体 |
| 细胞MAPKAP KINASE2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
转化相关基因MED11抗体 |
| CASPASE-3蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 |
丝裂原活化蛋白激酶3K10抗体 |
| 热休克蛋白90α重组兔单克隆抗体 |
EXOSC6蛋白抗体 |
| 3’末端DNA探针同位素([α32P]dATP)聚合酶标记试剂盒 |
酶原颗粒同源蛋白16B抗体 |
| 细菌苯丙琼脂平板 |
蛋白酶激活受体4抗体 |
| 组织PYK2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
大鼠脑动脉血管内皮细胞AFAP1L2抗体 |
| 血管内皮生长因子受体1抗体 |
跨膜蛋白106B抗体 |
| 大鼠肾动脉平滑肌细胞 |
兔外根鞘细胞 |
| Rat Uterine Smooth Muscle Cells |
Primary human gallbladder artery endothelial cells |
关键注意事项:
无菌操作 这是细胞培养的生命线。操作前需对超净台进行紫外灭菌,操作过程要规范、迅速,避免污染。
消化控制 酶消化是关键步骤。消化时间过长会损伤细胞,过短则解离不充分。需根据组织类型和酶活性灵活调整。
细胞状态 原代细胞非常脆弱,尤其是首次传代时,应保证较高的接种密度,否则细胞难以生长。
冻存策略 原代细胞不建议在P0代直接冻存。通常建议在细胞状态较好的P2或P3代进行冻存,以保证复苏后的活性。