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| 销售商： 抚州翊立飒生物科技开发有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
商品属性：
| 产品名称 | 大鼠脊髓成纤维细胞 |
| 英文名称 | Rat Spinal Cord Fibroblast Cells |
| 组织来源 | 脊髓组织 |
| 默认种属 | 大鼠 |
| 产品货号 | YLS-XB11348 |
细胞简介 ：
大鼠脊髓成纤维分离自脊髓组织；脊髓是细细的管束状的神经结构，位于脊柱的椎管内且被脊椎保护；是源自脑的中枢神经系统延伸部分。中枢神经系统的细胞依靠复杂的联系来处理传递信息。脊髓的主要功能是传送脑与外周之间的神经信息。人和脊椎动物中枢神经系统的一部分，在椎管里面，上端连接延髓，两旁发出成对的神经，分布到四肢、体壁和内脏。脊髓的内部有一个H形（蝴蝶型）灰质区，主要由神经细胞构成；在灰质区周围为白质区，主要由有髓神经纤维组成；脊髓是许多简单反射的中枢。脊髓两旁发出许多成对的神经（称为脊神经）分布到全身皮肤、肌肉和内脏器官。脊髓是周围神经与脑之间的通路，也是许多简单反射活动的低级中枢。按脊神经的出入可把脊髓也分为相应的31节，31对脊神经就是由不同的脊椎发出的。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的脊髓成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。脊髓成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括：构造和维持组织的正常形态；合成和释放细胞外基质；组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
方法简介 公司实验室分离的大鼠脊髓成纤维采用-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠脊髓成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
关键操作流程：
大鼠脊髓成纤维分离自脊髓组织；脊髓是细细的管束状的神经结构，位于脊柱的椎管内且被脊椎保护；是源自脑的中枢神经系统延伸部分。中枢神经系统的细胞依靠复杂的联系来处理传递信息。脊髓的主要功能是传送脑与外周之间的神经信息。人和脊椎动物中枢神经系统的一部分，在椎管里面，上端连接延髓，两旁发出成对的神经，分布到四肢、体壁和内脏。脊髓的内部有一个H形（蝴蝶型）灰质区，主要由神经细胞构成；在灰质区周围为白质区，主要由有髓神经纤维组成；脊髓是许多简单反射的中枢。脊髓两旁发出许多成对的神经（称为脊神经）分布到全身皮肤、肌肉和内脏器官。脊髓是周围神经与脑之间的通路，也是许多简单反射活动的低级中枢。按脊神经的出入可把脊髓也分为相应的31节，31对脊神经就是由不同的脊椎发出的。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的脊髓成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。脊髓成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括：构造和维持组织的正常形态；合成和释放细胞外基质；组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
方法简介 公司实验室分离的大鼠脊髓成纤维采用-胶原酶混合酶消化后差速贴壁制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠脊髓成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
关键操作流程：
原代细胞的制备是整个实验成功的基础，其核心在于将组织分散成单个活细胞。
1. 组织取材与预处理
无菌操作：整个过程必须在超净台内严格无菌进行，所有器械和溶液都需灭菌。
快速处理：组织从生物体取出后应尽快处理，以维持细胞活力。若不能立即处理，需在4℃条件下短期保存。
清洗与剪切：用预冷的PBS或Hank's液反复冲洗组织，去除血污和杂物。然后用无菌眼科剪将组织剪成约1mm³的微小碎块。
2. 细胞分离方法
根据组织类型和研究目的，主要有以下三种分离策略：
分离方法 原理与适用组织 优点 缺点
酶消化法 利用酶（如胰蛋白酶、胶原酶）降解细胞间质，适用于肝、肾、皮肤、肿瘤等大多数实体组织。 细胞得率高，分离效果好，是最常用的方法。 酶可能对细胞造成损伤，需精确控制消化时间和温度。
组织块培养法 将组织块直接贴附于培养瓶，细胞从边缘自然迁出。适用于上皮、胚胎等细胞间质少的组织。 操作简单，对细胞损伤小，能较好保留细胞特性。 细胞迁出和增殖周期长，得率相对较低。
机械分散法 通过剪切、研磨、筛网过滤或吸管吹打等物理方式分散组织，适用于脑组织等柔软样本。 快速，避免了酶对细胞的潜在毒性。 细胞损伤大，得率和存活率低，易形成细胞团块。
常用酶简介
胰蛋白酶 (Trypsin)：作用强，适用于细胞间质较少的软组织。其活性依赖不含钙、镁离子的环境。
胶原酶 (Collagenase)：特异性水解胶原蛋白，对细胞损伤小，尤其适用于富含结缔组织的坚硬器官（如乳腺、骨、软骨）。
3. 细胞培养与观察
终止消化：酶消化后，需加入含血清的培养基来终止反应，因为血清中含有抑制胰蛋白酶活性的因子。
过滤与接种：通过细胞滤网过滤，去除未消化的组织块，离心收集细胞后用完全培养基重悬，接种到培养瓶中。
耐心观察：原代细胞生长通常较缓慢，可能需要24小时甚至更长时间才能在镜下观察到贴壁的细胞。
常见难点与解决方案：
原代培养常被称为“玄学”，主要因为以下痛点：
1. 细胞不贴壁或死亡率高
原因： 消化过度、物理损伤或“失巢凋亡”。
对策： 优化酶浓度和时间；在培养基中添加 ROCK抑制剂 或特定的贴壁因子（如层粘连蛋白、纤连蛋白）。
2. 杂细胞污染（主要是成纤维细胞）
现象： 成纤维细胞生长极快，会迅速淹没目的细胞（如上皮细胞）。
对策：
差速贴壁法： 利用成纤维细胞贴壁快（1-2小时）的特性，先让其在培养瓶贴壁，收集未贴壁的悬液（含目的细胞）进行培养。
抑制剂法： 使用阿糖胞苷或特定抗体清除杂细胞。
3. 批次差异大
原因： 供体年龄、健康状况、取材部位不同。
对策： 尽量使用同一批次冻存的细胞进行实验；或者在实验设计时增加生物学重复。
公司正在出售的产品：
| 细胞过氧化氢（HYDROGEN PEROXIDE）活性比色法定量检测试剂盒 | 回肠脂肪酸结合蛋白抗体 |
| 牛奶维生素A含量荧光定量检测试剂盒 | L－谷氨酰对硝基苯胺一水（L－Glutamyl－p－Nitroanilide monohydrate） |
| 细胞HPV7（HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7）病毒定量PCR | 1,001,610,135 |
| CRASP基因甲基化程度定量分析试剂盒 | Pacific Blue标记小鼠CD19单克隆抗体 |
| 石蜡切片组织VEGF蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | 富含亮氨酸重复神经元5抗体 |
| 细胞JNK1激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | 肿瘤坏死因子受体超家族成员14抗体 |
| 冰冻切片组织PDGF-B蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | 天门冬氨酸甲基转移酶PCMT抗体 |
| AF680标记的雌激素受体α抗体 | DNA损伤自噬调整蛋白抗体 |
| 红细胞可溶性膜蛋白（纯提）制备试剂盒 | 磷酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体 |
| 细菌苯胺黑负性染色试剂盒 | 大肠杆菌外膜孔道蛋白C抗体 |
| 细胞磷酸葡萄糖酸脱氢酶（phosphogluconate dehydrogenase；PGD）活性比色法定量检测试剂盒 | 大鼠脊髓成纤维细胞5-羟色胺转运蛋白抗体 |
| 胰岛素样生长因子结合蛋白4抗体 | 淋巴细胞抗原6G抗体 |
| 大鼠乳腺上皮细胞 | 兔胸腺基质细胞 |
| Rat Uterine Fibroblast Cells | Primary vertebral endplate chondrocytes in rats |
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