细胞简介:

大鼠滑膜间充质干分离自滑膜组织;滑膜组织是位于关节腔内面的内衬结构,各种关节内疾病均会累及滑膜。而滑膜细胞是维持关节正常功能的重要组织结构,同时在各种关节疾患中也是主要病变部位。骨关节炎(OA)以关节软骨退行性变为特征,其病理改变累及关节的各个组成部分,但绝不仅局限于软骨,还包括软骨下骨、滑膜、半月板和韧带。各组成部分的病理改变相互影响,相互作用,共同加速关节的退变。滑膜细胞是构成滑膜层的大细胞群体,是维持关节正常功能的重要组织结构,它包埋在颗粒状无定性的基质中,基质内有分散的纤维分布。滑膜由A型(巨噬样滑膜细胞)、B型(成纤维样滑膜细胞)以及C型(树突细胞样滑膜细胞)细胞组成。滑膜细胞主要功能:①滑膜细胞产生润滑液成分,并且与关节腔的吸收和血液/润滑液交换有关;②滑膜细胞增生,表现为不依赖于支持物生长,并且分泌大量的效应分子来促进炎症和关节损坏;③是自身自分泌和旁分泌网络中效应因子的一部分。
方法简介 公司实验室分离的大鼠滑膜间充质干采用胶原酶消化法和低密度接种法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠滑膜间充质干经CD90免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态佳
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
生物学特性:
原代细胞的核心价值在于其高度的生理相关性,这主要体现在以下几个方面:
高度模拟体内状态
原代细胞直接从机体取出,离体时间短,因此最大程度地保留了其来源组织的遗传特征、基因表达谱、代谢功能和细胞间相互作用。这使得它们能够真实地反映细胞在体内的生长状态和对各种刺激的反应。
有限的增殖能力
与可以无限增殖的细胞系不同,原代细胞是正常的、未经转化的细胞,其分裂能力有限。它们通常只能传代10次以内(通常将第1至第10代的细胞统称为原代细胞),随后便会进入衰老期并死亡,这一现象与“海弗利克极限”有关。
遗传稳定性
原代细胞通常保持正常的二倍体染色体数目,遗传物质未发生改变。这确保了实验结果的准确性,避免了因长期体外培养导致的基因突变或染色体异常。
细胞异质性
从组织中分离的原代细胞群体可能包含多种细胞类型,例如在培养上皮细胞时,常常会伴随有成纤维细胞的生长。这种异质性在一定程度上反映了体内组织的真实构成,但也对细胞的纯化提出了要求。
基本参数:
在实际操作和应用中,原代细胞表现出以下基本参数特征:
参数维度 特征描述
来源与制备 直接来源于人或动物的新鲜组织、器官、外周血或胚胎。通常使用胰蛋白酶、胶原酶等进行酶消化,或采用机械法分散获得单个细胞悬液。
培养条件 培养要求较为苛刻,需要特定的培养基、生长因子和适宜的贴壁表面(如经细胞外基质蛋白包被),且对无菌操作要求极高。
生长特性 生长相对缓慢,增殖能力弱。不同来源的细胞增殖能力不同,例如骨骼肌细胞可传代10-12代,而上皮细胞通常在3-4代后成纤维细胞会成为优势细胞。
成本与周期 分离和培养过程耗时、费力,且成本较高。由于增殖能力有限,不适合大规模、长期的实验。
公司正在出售的产品:
| 细胞二胺氧化酶(DAO)活性比色法定量检测试剂盒 |
肌动蛋白解聚因子抗体 |
| 体液维生素B1高效液相色谱法定量检测试剂盒 |
N――苯甲酰-DL-精对硝基苯胺盐酸盐(BAPNA) |
| 通用型KSHV(KAPOSI SARCOMA-ASSOCIATED HERPESVIRUS) |
超氧化物歧化酶(SOD)酵母/真菌裂解样品制备试剂盒 |
| CACNA1G基因甲基化程度定量分析试剂盒 |
PE标记人CD45RB单克隆抗体 |
| 载玻片细胞RHO 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
富含亮氨酸重复跨膜神经元蛋白1抗体 |
| 细胞JNK2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
肿瘤坏死因子受体1抗体 |
| 冰冻切片组织BCL2蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
四聚体多肽蛋白21B抗体 |
| 双微体2癌基因单克隆抗体 |
DZIP1L蛋白抗体 |
| 金属元素定量检测试剂专题 |
磷酸肌醇3激酶接头蛋白1抗体 |
| 组织HHV6-A(HUMAN HERPESVIRUS 6-A)病毒定性检测试剂盒 |
大肠癌肿瘤突变蛋白抗体 |
| 细胞丙酮酸羧化酶(PEPCase)活性酶耦联比色法定量检测试剂盒 |
大鼠滑膜间充质干细胞5-羟色胺受体1E抗体 |
| 血小板内皮细胞黏附分子1抗体 |
跨膜蛋白TMPPE抗体 |
| 兔腹膜毛细血管内皮细胞 |
小鼠嗅球细胞 |
| Rat Prostate Smooth Muscle Cells |
Mouse Dental Pulp Stem Cells |
关键注意事项:
无菌操作 这是细胞培养的生命线。操作前需对超净台进行紫外灭菌,操作过程要规范、迅速,避免污染。
消化控制 酶消化是关键步骤。消化时间过长会损伤细胞,过短则解离不充分。需根据组织类型和酶活性灵活调整。
细胞状态 原代细胞非常脆弱,尤其是首次传代时,应保证较高的接种密度,否则细胞难以生长。
冻存策略 原代细胞不建议在P0代直接冻存。通常建议在细胞状态较好的P2或P3代进行冻存,以保证复苏后的活性。