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| 销售商： 抚州翊立飒生物科技开发有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
商品属性：
| 产品名称 | 大鼠巩膜成纤维细胞 |
| 英文名称 | Rat Scleral Fibroblast Cells |
| 组织来源 | 巩膜组织 |
| 默认种属 | 大鼠 |
| 产品货号 | YLS-XB11374 |
细胞简介 ：
大鼠巩膜成纤维分离自巩膜组织，巩膜是眼球壁的主要组成之一。是眼球纤维膜的后5/6部分。前方联接角膜，后方与视神经的鞘膜延续。巩膜在视神经穿出部附近厚，愈前愈薄，在肌腱附着处又复增厚。其与角膜交界处，外面有环形的角膜沟，深部有巩膜静脉窦。小儿的巩膜为浅蓝色，成年为白色，老年因脂肪沉着而带黄色。巩膜结构坚韧，有支持和保护眼内组织的作用。成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
方法简介 公司实验室分离的大鼠巩膜成纤维采用混合胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠巩膜成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件 贴壁不包被
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传2-3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
关键操作流程：
大鼠巩膜成纤维分离自巩膜组织，巩膜是眼球壁的主要组成之一。是眼球纤维膜的后5/6部分。前方联接角膜，后方与视神经的鞘膜延续。巩膜在视神经穿出部附近厚，愈前愈薄，在肌腱附着处又复增厚。其与角膜交界处，外面有环形的角膜沟，深部有巩膜静脉窦。小儿的巩膜为浅蓝色，成年为白色，老年因脂肪沉着而带黄色。巩膜结构坚韧，有支持和保护眼内组织的作用。成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来；成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
方法简介 公司实验室分离的大鼠巩膜成纤维采用混合胶原酶消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠巩膜成纤维经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件 贴壁不包被
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传2-3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
关键操作流程：
原代细胞的制备是整个实验成功的基础，其核心在于将组织分散成单个活细胞。
1. 组织取材与预处理
无菌操作：整个过程必须在超净台内严格无菌进行，所有器械和溶液都需灭菌。
快速处理：组织从生物体取出后应尽快处理，以维持细胞活力。若不能立即处理，需在4℃条件下短期保存。
清洗与剪切：用预冷的PBS或Hank's液反复冲洗组织，去除血污和杂物。然后用无菌眼科剪将组织剪成约1mm³的微小碎块。
2. 细胞分离方法
根据组织类型和研究目的，主要有以下三种分离策略：
分离方法 原理与适用组织 优点 缺点
酶消化法 利用酶（如胰蛋白酶、胶原酶）降解细胞间质，适用于肝、肾、皮肤、肿瘤等大多数实体组织。 细胞得率高，分离效果好，是最常用的方法。 酶可能对细胞造成损伤，需精确控制消化时间和温度。
组织块培养法 将组织块直接贴附于培养瓶，细胞从边缘自然迁出。适用于上皮、胚胎等细胞间质少的组织。 操作简单，对细胞损伤小，能较好保留细胞特性。 细胞迁出和增殖周期长，得率相对较低。
机械分散法 通过剪切、研磨、筛网过滤或吸管吹打等物理方式分散组织，适用于脑组织等柔软样本。 快速，避免了酶对细胞的潜在毒性。 细胞损伤大，得率和存活率低，易形成细胞团块。
常用酶简介
胰蛋白酶 (Trypsin)：作用强，适用于细胞间质较少的软组织。其活性依赖不含钙、镁离子的环境。
胶原酶 (Collagenase)：特异性水解胶原蛋白，对细胞损伤小，尤其适用于富含结缔组织的坚硬器官（如乳腺、骨、软骨）。
3. 细胞培养与观察
终止消化：酶消化后，需加入含血清的培养基来终止反应，因为血清中含有抑制胰蛋白酶活性的因子。
过滤与接种：通过细胞滤网过滤，去除未消化的组织块，离心收集细胞后用完全培养基重悬，接种到培养瓶中。
耐心观察：原代细胞生长通常较缓慢，可能需要24小时甚至更长时间才能在镜下观察到贴壁的细胞。
常见难点与解决方案：
原代培养常被称为“玄学”，主要因为以下痛点：
1. 细胞不贴壁或死亡率高
原因： 消化过度、物理损伤或“失巢凋亡”。
对策： 优化酶浓度和时间；在培养基中添加 ROCK抑制剂 或特定的贴壁因子（如层粘连蛋白、纤连蛋白）。
2. 杂细胞污染（主要是成纤维细胞）
现象： 成纤维细胞生长极快，会迅速淹没目的细胞（如上皮细胞）。
对策：
差速贴壁法： 利用成纤维细胞贴壁快（1-2小时）的特性，先让其在培养瓶贴壁，收集未贴壁的悬液（含目的细胞）进行培养。
抑制剂法： 使用阿糖胞苷或特定抗体清除杂细胞。
3. 批次差异大
原因： 供体年龄、健康状况、取材部位不同。
对策： 尽量使用同一批次冻存的细胞进行实验；或者在实验设计时增加生物学重复。
公司正在出售的产品：
| 组织硫氧还蛋白还原酶（thioredoxin reductase）活性比色法定量检测试剂盒 | 基质细胞衍生生长因子SF20抗体 |
| 动物源性食品猫源基因检测试剂盒 | 糖果糖精（saccharin）含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 |
| 细菌电转试剂盒 | 脂质过氧化物4-羟基壬烯醛（4－HNE）ELISA定量测定试剂盒 |
| 6倍蔗糖DNA电泳上样缓冲液 | PE标记小鼠CD103单克隆抗体 |
| 石蜡切片组织CREB蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | 干扰素诱导跨膜蛋白1抗体 |
| 体液肌酸激酶同工酶混合型（CK-MB）活性比色法定量检测试剂盒 | 指(趾)关节粘连NOG蛋白抗体 |
| 冰冻切片组织CASPASE-5蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 | 四分子交联体14抗体（四旋蛋白） |
| 神经元素3单克隆抗体 | EVI5L蛋白抗体 |
| 石蜡切片脂质尼罗红间接染色试剂盒 | 镁转运蛋白NIPAL4抗体 |
| 细胞科萨基病毒A（Coxsackievirus A）定量PCR扩增检测试剂盒 | 成熟T淋巴细胞增殖蛋白1抗体 |
| 组织Akt/PKB激酶总活性定量检测试剂盒（A/B/C） | 大鼠巩膜成纤维细胞2号染色体开放阅读框47抗体 |
| 血小板p47蛋白抗体 | 跨膜蛋白SEMA3D抗体 |
| 兔口腔上皮细胞 | 小鼠神经星形胶质细胞 |
| Rat Trabecular Meshwork Cells | Primary human thyroid epithelial cells |
手机版：大鼠巩膜成纤维细胞
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